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酶学分析方法及酶活性测定复习与练习 一、有关酶的基本理论知识 酶浓度与酶促反应速度的关系是？ 底物浓度与酶促反应速度的定量关系式是？ 影响酶促反应速度的因素主要有哪些？ Km及Vm代表的含义及它们在临床酶活性测定中应用及意义。 二、酶活性测定的基本知识 1、酶活性的概念及酶活性单位如何表示表示 2、目前酶活性单位有-------、----------、-------------三种表示方式。？ 3、解释酶活性国际单位、催量（Katal）的概念，并比较两者的关系？ 4、酶活性单位的计算：几类计算公式要求理解并熟练应用。 1）通用公式 2）惯用单位的计算公式（测定产物生成类的计算公式；测定底物消耗类的计算公式） 3）**连续监测法根据摩尔吸光系数进行酶活性浓度的计算； **连续监测法因素F值（全自动化生化仪多用K表示）的计算和应用？ 三、酶活性的测定方法 1、酶活性测定的基本原则是什么？ 2、酶反应时间进程曲线有————、—————、————三个时期 酶活性测定是在————期测定，此时期反应速度不受------------的影响也称------期 3、根据反应时间，酶活性测定分为两类方法是---------和--------------两种 从概念、结果计算、优缺点叙述并比较两类方法 ？其中连续监测法 4、按检测对象的酶活性测定方法分为----------和------------法；其直接法的方法类型有哪些？ 5、何谓酶偶联反应？写出酶偶联反应的基本模式？什么是待测酶、辅助酶、指示酶？ 6、何谓工具酶？酶作为工具应用于临床生化检验可进行酶活性测定或进行代谢物浓度（底物）的测定时一般有哪两大指示系统？何谓-Trinder反应？Trinder反应的主要缺点或影响因素有哪些？ 7、何谓同工酶？同工酶分析的常用原理有哪些？检测同工酶有何临床意义？并举例说明？ 8、酶活性测定条件及影响因素有哪些？ 9、从几个酶类测定（如AMY、ALT、LD、ALP|等）的实验操作中，讨论酶活性测定应注意的问题？ 10、试述影响血清酶的生理变异有哪些？ 11、酶活性测定，标本的采集、处理、贮存及样品试剂比有何要求？ 四、体液酶测定： 1、常用于临床协助诊断的血浆酶有哪些？用于协助诊断心肌损伤、肝脏疾病、胰腺疾病、骨骼骨骼肌、前列腺疾病等的常用的血清酶有哪些？常用的临床诊断酶谱有哪些？ 2、将各血清酶活性测定的方法学原理进行分析归纳，请总结出有哪几大反应基础。 3、书写出AMS、ALP两种（化学比色法、（连续监测法）方法及ALT、AST、GGT、LDH、CK酶测定（连续监测法）反应原理、主要试剂成分和作用？影响结果准确性因素有哪些？评价LD-L反应和 LD-P反应试剂盒的优缺点？ 4、血清ALT、AST、ALP、GGT、AMS、CK、LD等酶测定的临床意义？ 五、选择题： A 1、K m是指反应速度为最大反应速度一半时的 A 底物浓度 B 酶浓度 C 激活剂浓度 D 温度 E 抑制剂浓度 D 2、根据1976年国际生化学会生化委员会规定，酶的一个国际单位是指 A 最适条件下，每小时催化生成1mmol/l产物的酶量 B 最适条件下，每分钟催化生成1mmol/l产物的酶量 C 最适条件下，每小时催化生成1umol/l产物的酶量 D 特定条件下，每分钟催化1umol底物产生变化所需的酶量 E 25℃及其它最适条件下，每分钟催化1umol底物产生变化所需的酶量 E 3、IFCC推荐法测定AST的辅助酶是 A G6PD B HK C POD D LDH E MDH B 4、以NAD（P）或NAD（P）H为指示系统的酶活性测定主波长应设置为： A 293nm B 340nm C 405nm D 380nm E 500nm D 5、以ＮＡＤ还原为ＮＡＤＨ反应为基础的生化分析，采用波长及吸光度变化为： Ａ、340nm Ａ下降 Ｂ、405nm Ａ上升 Ｃ、500nm Ａ下降 Ｄ、340nm Ａ上升 Ｅ、405nm Ａ下降 A 6、淀粉酶测定显著升高主要见于： Ａ、溃疡病穿孔 Ｂ、急性胰腺炎 Ｃ、甲亢 Ｄ、糖尿病 Ｅ、肾病综合症 C 7、正常成人血清LD同工酶电泳区带的结果应符合： A LD1LD2LD3LD4LD5 B LD1LD2LD3LD4LD5 C LD2LD1LD3LD4LD5 D LD3LD1LD2LD4LD5 E LD4LD1LD