銀黄颗粒微生物限度检查方法验证.docVIP

贵州宏奇药业有限公司 银黄颗粒 微生物限度检查方法验证 验 证 人：顾荣跃 验证单位：贵州宏奇药业有限公司 验证日期：2014年11月 原始资料保存处：贵州宏奇药业有限公司 联 系 人：李天权 联系电话：0858-5315027转210 贵州宏奇药业有限公司 银黄颗粒微生物限度检查方法 【处方】金银花提取物?(以绿原酸计)2.4g?;?黄芩提取物（以黄芩苷计）24g 【制法】以上二味，加蔗糖粉480g与淀粉适量，粉碎成细粉，混匀，制成颗粒，60℃以下干燥，制成600g，即得。 【用法用量】开水冲服。一次1～2袋，一日2次。 【规格】每袋装4g 【微生物限度检查】 细菌: 取供试品10g,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，充分混匀，作为1:10供试液。取1:10供试液4ml加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至10ml，充分混匀，作为1:25供试液。取1:25供试液1ml分别注入5个平皿中，每皿0.2ml（平行操作两份）。按中国药典2010年版一部附录XⅢC微生物限度检查法中培养基稀释法检查。 霉菌及酵母菌: 取1:10供试液2ml,每1ml注入1个平皿中（平行操作两份）。按中国药典2010年版一部附录XⅢC微生物限度检查法平皿法检查。 控制菌检查： 大肠埃希菌：取1:10的供试液按中国药典2010年版一部附录ⅩⅢ C微生物限度检查法规定的相应方法检验。胆盐乳糖增菌液的用量为100ml。 银黄颗粒 微生物限度检查方法验证报告 一、检验目的：确认对供试品进行微生物限度检查时，所采用的细菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法是否适合于该样品的微生物限度检查。 二、样品：银黄颗粒 批号20141102规格：每袋装4g 生产企业：贵州宏奇药业有限公司 供样单位：贵州宏奇药业有限公司 三、培养基 胆盐乳糖增菌液 批号：140309 玫瑰红钠琼脂 批号：140511 营养琼脂 批号：140211 营养肉汤 批号：140509 改良马丁 批号：131240 改良马丁琼脂 批号：140311 麦康凯琼脂（MacC） 批号：140206 （以上培养基均由上海博微生物科技有限公司提供） 四、菌种 枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) [CMCC(B)63501] 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) [CMCC(B) 26003] 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B) 44102] 白色念珠菌 (Candida albicans) [CMCC(F) 98001] 黑曲霉菌 (Aspergillus nier) [CMCC(F)98003] （以上菌种由贵州省药品检验所提供） 五、试验所用仪器37℃培养18~24小时的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌的肉汤培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-5 ~10-7，约为50～100cfu/ml的菌液，做活菌计数备用。 2、取经25~28℃ 培养18~24小时的白色念珠菌液体培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-5 ~10-6，约为50~100cfu/ml的菌液，做活菌计数备用。 3、取经25℃ 培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加5ml 0.9%无菌氯化钠溶液洗下黑曲霉菌孢子，吸取出孢子悬液1ml，加0.9%无菌氯化钠溶液适量稀释，取1 ml稀释后的孢子悬液，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-4，约为50~100cfu/ml的菌液，做活菌计数备用。 4、菌液的检验 4.1取上述金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌10-5 ~10-7稀释液1ml，用45℃营养琼脂培养基20ml注皿，各平行测定两皿，30～35℃培养48小时，计数，应约为50~100cfu/ml。 4. 2 取上述白色念珠菌10-5 ~10-6稀释液及上述黑曲霉菌菌10-4孢子悬液各1ml，用45℃玫瑰红钠琼脂培养基20ml注皿，各平行测定两皿，23～28℃培养,逐日观察计数，应约为50~100cfu/ml。 七、细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证 检验依据：参照中