实验诊断学实验报告(牡丹江医学院).docxVIP

实验诊断学试验操作报告目录红细胞计数试验血红蛋白测定白细胞计数白细胞分类计数尿比重尿沉渣定性检查尿蛋白检查磺基水杨酸法尿干化学分析尿葡萄糖定性检查（班氏法）ABO血型测定红细胞计数试验实验目的：通过红细胞计数实验1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。2、掌握血细胞计数板的结构试验器材：血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、生理盐水实验原理：一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中显微镜下计数一定容积内的细胞，再换算成每升标本的细胞数报告。操作步骤： 1、取红细胞稀释液2.0ml毫升，放入一小试管内。2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内，上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。6、待2—3分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。红细胞计数的区域：中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。计数原则：数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。计算：答案不唯一，言之有理即可红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106或红细胞数/L=5个中方格内红细胞数÷100×1012式中×5 5个中方格换算成1个大方格×10 1个大方格容积为0.1ul，换算成1.0 uL。×201 血液的稀释倍数×106由u1换算成L数据处理： RBC: ×l012/L参考值男:(4～5.5)×1012/L 　　　女：（3.5～5）×1012/L新生儿：（6～7）×1012/L注意事项：1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血凝块应重新采血。2充液前，红细胞复液要充分摇匀，红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀，不可有气泡，亦不可有多余液体外溢。3、中方格内红细胞分布应均匀，健康成人每中方格红细胞数约为80—100个，各中方格内之红细胞相近，如悬殊过大(超过10个细胞以上的)应重混匀再充填。血红蛋白测定实验目的：通过血红蛋白测定1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。试验仪器：试管、微量吸管、分光光度计实验原理：血红蛋白中的亚铁离子（Fe2+）被高铁氰化钾氧化成高离子（Fe3+），血红蛋白转化成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白与氰离子（CN-）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在540nm波长比色。从HicN参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。操作步骤： 1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟2、用721光电比色仪，540nm波长，试剂为空白调0点比色，读取光密度，查标准曲线得结果。计算：血红蛋白（g/L）=测定管吸光度×367.7数据处理：答案不唯一，言之有理即可Hb：g／L参考值男0.40～0.54L/L女: 0.37～0.48L/L儿童：0.35～0.49L/L新生儿：0.50～0.60L/L注意事项：1、做血红蛋白测定，白细胞计数和分类计数，在采血时应先做血膜再做红细胞，然后做白细胞，血红蛋白检验，避免红细胞破坏。白细胞计数实验目的：掌握白细胞计数显微镜计数法原理及技术。实验器材：显微镜、微量吸管、计数板、盖玻片、白细胞稀释液。实验原理：用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞，混匀后充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经过换算求得每升血液内的白细胞数。操作步骤：1、取试管1支，加白细胞稀释液0.38ml。2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血20微升或抗凝血20微升。3、擦去管尖外部余血、轻轻注入稀释液底部，再吸取上清液清洗3次，摇匀。4、将计数板与盖玻片用软布擦净，将盖玻片覆盖于计数池上，再用微量吸管吸取悬液，充入计数池与盖玻片间的细缝隙中，静止2-3分钟，待白细胞下沉。5、用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数。计算：(四个大方格内WBC数/4)×10×20×106 =WBC数/20×109/升数据处理：答案不唯一，言之有理即可正常参考值：成人：（4-10）×109/升新生儿：（15-20）×109/升6月-2岁：（11-12）×109/升白细胞分类计数实验目的：掌握白细胞分类计数、原理及技术。实验器材：显微镜、染色缸和架，载玻片、瑞氏染液、香柏油、二甲苯。实验原理：把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，经wright染色后，显微镜下观察，根据白细胞形态特点逐个分类计数。得出各种白细胞的相对比值，并注意观察其形态和质量的变化。操作步骤：1、取末梢血1滴。置于载玻片的一端，