(110530仪器分析实验讲义.docVIP

实验 2.练习基于保留值和用已知物对照的的定性分析方法。 二、原理 试样被气化后，随同载气进入色谱柱，由于不同组分在流动相（载气）和固定相间分配系数的差别，当两相做相对运动时各组分在两相中经多次分配而被分离。 在酿造白酒的过程中，不可避免的有甲醇产生，根据国家标准（GB 10343—89），食用酒精中甲醇含量应低于0.1g.L-1（优级）或0.6g.L-1(普通级)。 利用气相色谱可分离、检测白酒中的甲醇含量。在相同的操作条件下分别将等量的试样和含甲醇的标准样进行色谱分析，由保留时间可确定试样中是否含有甲醇，比较试样和标准样中甲醇峰的峰高可确定试样中甲醇的含量。 三、仪器与试剂 Agilent 7890 气相色谱仪、FID检测器：氮气源，毛细管柱 甲醇（色谱纯） 乙醇（色谱纯） 白酒（市售） 四、步骤 1.色谱条件： 色谱柱： 毛细管色谱柱 分流FID检测器，进样量：0.2uL,汽化室温度：150℃，载气：氮气，总流量：36mL/min,分流比：10：1，隔垫吹扫流量：3 mL/min，柱流速：3 mL/min，柱箱温度：50℃，检测器温度：200℃，氢气：空气：氮气=40：450：25. 2.气相色谱仪的基本操作流程 （1）开启： a、开启载气N2钢瓶的阀门，调压为0.4-0.6MPa； b、打开氢气发生器、空气发生器； c、打开7890A色谱仪的开关，待GC进入自检，自检完成后会提示“Power on Successful”； d、开启计算机，进入Windows系统后，双击电脑桌面的（Instrument Online） （2）参考实验条件：分流FID检测器，进样量：0.2uL,汽化室温度：120℃，载气：氮气，总流量：36mL/min,分流比：10：1，隔垫吹扫流量：3 mL/min，柱流速：3 mL/min，柱箱温度：50℃，检测器温度：200℃，氢气：空气：氮气=40：450：25. （3）调出本实验所用测试方法待检测器FID点火成功，基线平稳后，准备做样采集数据； （4）从运行序列表中调出运行序列，选后进样器，输入样品瓶名称及位置，进样针数及进样量0.2uL，及进样方法名称 ； （5）自动进样器开始进样，运行； （6）数据处理 （7）结束时，调出关机程序。辅助I：50℃；column：50℃；FID：50℃。先关闭氢气、空气源。等到温度降至该设置温度时，方可关闭色谱仪电源，最后关闭载气阀门。 3. 在上述色谱条件下，分别以甲醇、乙醇和白酒溶液进样，得到色谱图，根据保留时间确定甲醇峰。 五、结果计算 选用合适的方法计算样品中甲醇的含量，判断白酒中甲醇是否超标。  实验二 苯系物的高效液相色谱法分析 一、实验目的 掌握高效液相色谱仪器的构造及基本使用方法。 理解和掌握归一化法对组分含量的测定。 二、基本原理 采用非极性的十八烷基键合相为固定相和极性的甲醇-水溶液为流动相的反相色谱分离模式特别适合于同系物如苯系物的分离。苯系物具有共轭双键，但因共轭体系的大小和极性不同，因而在固定相和流动相之间的分配系数不同，导致在柱内的移动速率不同而先后流出柱子。苯系物在紫外区有明显的吸收，可以利用紫外检测器进行检测。在相同的实验条件下，将测得的未知物的保留时间与已知纯物质对照进行定性分析。 当试样中的各组分都能流出色谱柱，并在色谱图上显示色谱峰时，可用归一化法定量分析。 设试样中有n个组分，各个组分的质量分别为m1,m2,……..mn，其中组分i的质量分数wi可按下式计算： wi= mi/m×100%= mi/m1+m2+…+mn×100%=Aifi/ A1f1+ A2f2+…Anfn×100% fi为质量校正因子，得质量分数，Ai为峰高（峰面积）。 若个组分的f值相同，例如同系物中沸点接近的各组分，上式可简化为： wi= mi/m×100%= mi/m1+m2+…+mn×100%=Ai/ A1+ A2+…An×100% 三、仪器及试剂 高效液相色谱仪（配紫外检测器，检测波长254nm） 超声波清洗机 25μL平头微量注射器 苯、甲苯、联苯 流动相的体积配比为：甲醇：水=80：20 四、实验步骤： 1. 打开输液泵电源，仪器自检。 2. 从输液泵显示屏输入流动相流速，启动泵。 打开紫外检测器电源及氘灯。 打开色谱工作站及采集器电源，建立方法。 用流动相冲洗色谱柱，察看基线，基线稳定进样。 实验完成后按顺序关机。 五、数据记录及处理 六、结果讨论  实验三 红外分光光度法测定1、掌握红外光区分析时固态试样的制备方法。 2、了解如何从红外光谱图中识别基团以及如何从这些基团确定未知化合物的主要结构。 3、了解Perkin-Elmer 红外光谱仪的操作规程及使用。 二、红外光谱谱图解析 (一)、基团