【2017年整理】一种依赖HrpB独立于Ⅲ型分泌系统的胞外天冬氨酸蛋白酶作为青枯菌的一种毒力因子.docxVIP

一种依赖HrpB独立于Ⅲ型分泌系统的胞外天冬氨酸蛋白酶作为青枯菌的一种毒力因子 周大祥 生物工程学院基因工程中心 学号：20111901005 摘要：宿主特异性的青枯菌能够引起多种茄科植物萎焉，但对其认识还是很少。为了鉴定细菌的一个宿主特异性基因，选择典型菌株SL341（对辣椒有致病力，番茄无致病力）和SL2029（对番茄有致病力，辣椒无致病力）。我们发现来自SL2029的rsa1基因对SL341菌株失去辣椒萎焉能力。Rsa1基因编码一个11.8KDa的蛋白质，该基因上游有完整的共有hrpⅡ盒模体。尽管rsa1基因表达由HrpB—一种hrp基因表达的转录活性因子—激活，但Rsa1蛋白与天冬氨酸蛋白酶、组织蛋白酶D同源性较差，Rsa1蛋白拥有蛋白酶活性。两种特异性的天冬氨酸蛋白酶抑制剂抑肽素A和邻重氮乙酰-D,L-正亮氨酸甲酯能抑制该酶活性。将54和59位的天冬氨酸用丙氨酸取代，也会失去蛋白酶活性。SL2029菌株的rsa1突变体与野生型菌株相比毒力大大降低，不会引起辣椒萎焉症状。结果表明Rsa1蛋白是一种胞外天冬氨酸蛋白酶，在SL2029菌株侵染番茄扮演重要的作用。 引言 当植物在自然界遭遇致病菌时，致病菌有其特异性的易感宿主，它们能够定殖并成功的侵染。为了区分宿主-致病菌相互作用的特异性，通常会用到各种基因型和抗病品种。宿主特异性形成致病菌生理小种，它是由宿主抗性蛋白与致病菌无毒