【2017年整理】以动物细胞系统大量制造活性蛋白质.docxVIP

第十一章 以动物细胞系统大量制造活性蛋白质 Preparation of Large-scale Active Proteins Using Animal Cell Culture System 吴 灿 辉 环球基因生物科技股份有限公司 研发生产部 经理 一, 前言 动物细胞培养技术很早即建立,初期常因微生物的污染受困扰,至1913年Carrel将外科无菌操作技术应用在动物细胞培养上,细胞始能长期培养而不受污染.1916年Rous及Jones利用胰蛋白(trypsin)由组织中分解细胞,发展出附著性细胞的次培养法(subculture).在1948~1952期间,mouse纤维母细胞(fibroblast)和HeLa两种细胞株先后被Earle与Gey等学者建立.1955年Eagle开发生化学配方培养液(chemical defined medium),使得细胞培养不必再依赖体液培养.配合分子生物与生物科技技术的进展,1975年Kohler和Milstein研发出融合瘤(hybridoma)技术,之后被广用於单株抗体的制备.80年代第一个由动物细胞制造的重组蛋白组织胞浆素原激活(tissue plasminogen activator; t-PA)由美国Genentech 公司以中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CH