4DNA的紫外分光光度法定量测定-HZJ.pptVIP

分光光度计的基本部件 1. 光源 分光光度计上常用的光源有两种： 近紫外光区 可见光区 钨丝灯 近红外光 紫外光区——氢灯、氘灯 光→电 2. 单色器 单色器是把混合光波分解为单一波长光的装置。 棱镜 光波通过棱镜时，不同波长的光折射率不同，折射率与波长成负相关。 衍射光栅 在石英或玻璃的表面刻划许多平行线，通过光的干涉和衍射，形成光谱。 吸收池 （或称比色杯、比色皿、比色池） 一般由玻璃或石英制成 注意：a. 与光束垂直；b. 规格相同；c. 清洁 5. 检测器 光→电，并逐级放大 6. 测量装置 电流表、记录器和数字示值读数单元 752型分光光度计结构方框图 光源 吸收池 检测系统 分光系统 分光光度法在生物化学中的应用 一、常见的分光光度计 1. 紫外可见光分光光度计 2. 荧光分光光度计 3. 酶标仪 二、利用分光光度法对物质进行定量测定的方法。 （一） 标准曲线法 （一） 标准曲线法 配置浓度递增的标准溶液（C），在最大吸收波长（ ? max）处测得各个吸光度（A），绘制标准曲线（A-C曲线）。 在测定被测样品时，以相同条件在? max处测定A值，从标准曲线上查得该样品相应的浓度。 朗伯-比尔定律的分析应用 0 1 2 3 4 mg/ml A 。 。 。