固定化细胞发酵产酶[精选].pptVIP

固定化细胞发酵产酶 二组 固定化细胞是指固定在水不溶性载体上，在一定的空间范围进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。用于获得细胞的酶和代谢产物的一种方法 按固定的细胞类型不同分为三类(1)固定化微生物；(2)固定化动物；(3)固定化植物按细胞的生理状态不同分为两大类：(1)固定化死细胞：包括完整细胞、细胞碎片、细胞器。适用于一种酶催化的反应。(2)固定化活细胞：包括增殖细胞、静止细胞、饥饿细胞。适用于多酶反应，特别是需要辅酶的反应。 细胞固定化的方法 1.吸附法 利用载体和细胞表面所带电荷的静电引力,使细胞吸附于载体上。 吸附法可分为物理吸附和离子吸附两种。 用于细胞固定化的吸附剂主要有硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料、金属丝网、微载体、和中空纤维等。 2.包埋法 将细胞包埋在多空载体内部而制成固定化细胞的方法称为包埋法。 包埋法可分为凝胶包埋法和半透膜包埋法。 凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定方法。 常用的包埋剂为：聚丙烯酰胺、琼脂、海藻酸、卡拉胶、二醋酸纤维、三醋酸纤维、明胶等。 3.共价结合法 利用细胞表面的反应基团（如氨基、羧基、羟基、巯基、咪唑基）与活化的无机或有机载体反应，形成共价键将细胞固定。 用该法制备的固定化细胞一般为死细胞 4.交联法 利用双功能或多功能试剂与细胞表面的反应基团（如氨基、羧基、羟基、巯基、咪唑基）反应，从而使细胞固定。 常用的交联剂包括：戊二醛、甲苯二异氰酸酯、双重氮联苯胺。 吸附法：条件温和、方法简便、载体可再生。但操作稳定性差。 共价法：操作稳定性高。但由于试剂的毒性，易引起细胞的破坏。 交联法：可得到高细胞浓度，但机械强度低，无法再生，不适于实际应用。 包埋法：细胞和载体间没有束缚，固定化后，细胞仍保持较高活力。只适用于小分子底物。 固定化细胞发酵产酶的特点 产酶率高 高稀释率条件下连续发酵 发酵稳定性好 缩短发酵周期，提高设备利用率 产品容易分离提纯 固定化细胞发酵产酶工艺条件 预培养 采用生长培养基和适合细胞生长的条件 溶解氧的供给 加大通气量 温度的控制 培养基进入反应器之前，必须预先调节适宜的温度 培养基组分的控制 组分对载体的影响 在发酵中应用1.提高酶或菌体在发酵过程中的重复使用率，降低经济成本。2.制备了相关生物传感器，如葡萄糖生物传感器、微生物细胞数传感器、代谢试验传感器等 * *