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第二章色谱法导论 第一节 概述 第二节 色谱相关术语 第三节 色谱基本理论 第四节 色谱的定性和 定量 第一节 概述 一、茨维特的实验 茨维特： 俄国植物学家，主要 从事植物色素的研究 工作。 在1906 年发表的文章中，首次提出 了色谱（Chromatography）的概念。 分离过程是试样在两相间不断进行着的分配过程。 固定相和流动相。 色谱法和色谱分析 色谱法是一种分离方法。 它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相。 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。 色谱分析是一种分离、分析法。 二、色谱法的分类 1、按动力不同，色谱法可分为： 迎头色谱法 顶替色谱法 洗脱色谱法 2、按流动相状态的不同，可分为： 气相色谱法 ( Gas Chromatogaphy ) 将气体作为流动相 液相色谱法 ( Liquid Chromatogaphy ) 将液体作为流动相 超临界流体色谱法 ( Supercritical Fluid hromatogaphy ) 将超临界流体作为流动相 3、按固定相使用的形式可分为： 柱色谱法（Column Chromatography） 将固定相装在色谱柱内 纸色谱法（Paper Chromatography） 用滤纸做固定相或固定相载体的色谱 薄层色谱法（Thin Lay Chromatography） 固定相均匀涂在玻璃板或塑料板上 4、按分离机制不同分为： 分配色谱法 吸附色谱法 离子交换色谱法 排阻色谱法 5、按流动相与固定相的极性可分为： 正相色谱： 流动相极性小于固定相极性 反相色谱： 流动相极性大于固定相极性 6、其他色谱类型 凝胶色谱法( Gel chromatography ) 离子色谱法( Ion chromatography ) 毛细管电泳（Capillary Electrophoresis） 三、色谱法的特点 （1）分离效率高： 可分离复杂混合物，有机同系物、异构体，手性异构体等。 （2） 灵敏度高： 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 （3） 分析速度快： 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4） 应用范围广： 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 不足之处：被分离组分的定性较为困难。 第二节 色谱相关术语 一、关于色谱 1、色谱柱：用来承载固定相的装置。 2、固定相：色谱柱中固定不动的相。 3、流动相：色谱柱中流动的相。 4、色谱图： 5、色谱流出曲线： 6、色谱峰： 二、关于色谱峰 1）基线：在实验条件下，色谱柱后仅有纯流动相进 入 检测器时的流出曲线称为基线。 2）峰高：色谱峰顶点与基线的距离。 3）区域宽度：色谱流出曲线的一个重要参数。 4）标准偏差σ：0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。 5）半峰宽度：峰高为一半处的宽度。Y1/2=2.35? 6）峰底宽度：自色谱峰两侧的转折点所作切线在基 线上的截距。 Y= 4 ? 三、关于保留值 1) 保留时间(tR): 被测组分从进样开始到出现最大浓度值所需时间。Fo为流动相在色谱柱出口的体积流速。 2) 死时间(tM): 无保留组分出峰时间。 3) 调整保留时间(t’R): 4) 死体积(VM): 5) 保留体积(VR): 6) 调整保留体积(V’R): 7) 相对保留时间r21 优点：柱温、固定相性质不变，r21就是定值。 r21越大，说明两组份分离越好。 四、关于分