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检验经验汇总 【1】当液相鉴别中供试品与对照品出峰时间不一致，无法判断是否合格时，可用对照品与供试品各半配成混合溶液后进样，若峰宽未变宽，未出现驼峰，即可判断为合格 【2】在药材薄层色谱鉴别时应该考虑一下展开剂的温度与配制顺序，有时会影响色谱的结果 【3】用HPLC法测物质含量时，温度的控制极其重要，最好用有柱温箱的，如果没有就要装空调保持恒温后再测定，否则会出现基线飘移，结果不准确。 【4】在做一些乳膏的含量测定时，往往会使用提取分液，在分液时如两相的分界不清，可加少量的饱和氯化钠。分层处会比较明显。 【5】（1）用HPLC法测物质含量时，样品最好用流动相溶解，否则容易产生干扰峰，影响结果，特别有可能出现倒峰，一定要注意。 (2) 使用含有缓冲盐的流动相，容易堵塞管路和柱子，甚至检测器，如果检测器堵了，最好先不要拆，使用10%甲醇水超声加热一下作为流动相，慢慢小流量冲洗。效果很明显。 【6】在温度低的环境下做一些中药制剂的萃取时，往往会出现乳化现象，即两相不容易分层，这时可加入少量的饱和氯化钠溶液或者用电吹风对分液漏斗加温或用热抹布敷，可以加速其分层。 【7】中药制剂的溶液（比较稠或量少）要用滤纸过滤时，可以先通过离心的方法使之分层，再去过滤。这样可以加快过滤，减少有机溶剂的挥发（环境温度高时）。 【8】HPLC检测中，梯度条件容易产生干扰峰，可尝试通过以下几种方法规避： (1)使用重蒸后的水或用市售的纯净水（乐百氏的比较好） (2)尽量选用高波长下检测 (3)梯度程序尽量平缓 (4)样品浓度选用线性范围内的最高点 【9】当做高效液相测定肽类时，使用梯度条件情况下，在做第一针样品前，最好走一个空梯度，这样保留时间会一致些。 【10】做片剂的溶出度试验时（如红霉素、阿齐等）用硫酸一定要临用新配，否则硫酸吸水后会使结果偏低 【11】有人误将浓硝酸（在空气中有“发烟”现象）作为“发烟硝酸”使用，进行托哌生物碱药物的硝化－氢氧化钾呈色鉴别反应，结果不能得到正确的颜色反应，造成假阴性结果。该呈色反应的机理为利用样品的水解产物莨菪酸，经发烟硝酸加热硝化为三硝基衍生物，在氢氧化钾的醇溶液中形成醌型化合物而呈色。“发烟硝酸”是指含HNO3达86－97.5%以上的浓硝酸。而“浓硝酸”虽有发烟现象，但其HNO3仅为69%－71%，用于上述呈色反应，会因为硝酸浓度不足而使反应不完全，形成假阴性结果。 【12】做薄层鉴别方法研究时，有时候对照品斑点与样品相应斑点位置不一致，可以在样品点上加点对照品，注意点圆心要重合等，在相同方法展开，如果在相应位置上没有出现两个斑点，则认为是同样的物质斑点 【13】在用HPLC做定量检测时,柱温和流动相的比例要尽量保持一致,否则,保留时间和积分面积会发生变化,影响最终的检测结果 【14】在做HPLC时，假如发生重叠峰的现象，通常可以尝试以下几种方法： (1)改变流动相成分，如乙腈相改为甲醇相； (2)调整流动相比例； (3)调整流动相PH值； (4)梯度洗脱； (5)其他。 【15】做含量测定时，若对照品规定干燥时，一定要照规定方法干燥，否则测出的含量会差别很大，若没规定干燥时，参照2005年版凡例应用五氧化二磷干燥，否则测出的含量也会差别很大，别认为是刚从省所买的就忽视这一点，随便试几个对照品就知道了，结果差很多的。 【16】高浓度的NaOH标准溶液(比如0.5M)在使用过程中,桶底的部分往往会浓度变高,一般十升的溶液,最下面的一升就不能用了,否则会给滴定结果带来很大的偏差,尤其是夏天. 【17】点样之前先将薄层板活化一下，能够使结果更加优化，我通常放在烘箱里烤5分钟，再取出放冷。另外，展开剂应尽量精确，尤其是比例比较接近的 【18】曾经做过一次微生物检查的验证，细菌一般培养48小时，霉菌72小时，其实在细菌20个小时，霉菌40个小时左右的结果和最终的结果很相近的，如果不是在边缘，完全可以在很着急的情况下下结论。 【19】高效液相色谱柱的维护： a．使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）； b．大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围； c．避免流动相组成及极性的剧烈变化； d．流动相使用前必须经脱气和过滤处理； e．如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存于甲醇或乙腈中； f．氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。 【20】做微生物检查时，我曾经遇到过一件事，发现移液管中有干热灭菌法杀灭不了的细菌，我们对微生物检查的各个环节做了对照，才发现的，后来就改用一次性注射器了，虽然浪费了点，但是这种现象再也没有发生过。 【21】萃取过程产生的乳化，在乳化不是太严重情况下