【2017年整理】实验一 玻碳修饰电极分离检测水样中对苯二酚和邻苯二酚.docVIP

PAGE \* MERGEFORMAT 1 实验一 玻碳修饰电极分离检测水样中对苯二酚和邻苯二酚 （8学时） 一 、实验目的 1. 了解电聚合膜及修饰电极的制备方法。 2. 掌握CHI660D电化学工作站的使用方法。 3. 掌握修饰电极同时分离检测电活性物质的原理。 二、 实验原理 对苯二酚(Hydroquinone，HQ)和邻苯二酚(Catechol，CC)是重要的酚类化合物，同时也是应用广泛的化工原料。然而HQ和CC毒性较大，是一类有机污染物，对人体和环境危害较大。由于HQ和CC互为同分异构体，二者的物理性质和化学性质十分相似，故要快速、简便、灵敏地检测并区分二者有一定的难度。实验通过电聚合L-白氨酸（L-LEU）修饰玻碳电极分离检测HQ和CC。由于邻苯二酚、对苯二酚结构中含有羟基电化学活性官能团，可发生电化学反应。在一定条件下，邻苯二酚、对苯二酚的响应电流（I）与溶液浓度（C）成正比，即：I=KC。 采用差分脉冲伏安法对水样中的邻苯二酚、对苯二酚进行定量测定。差分脉冲伏安法是目前溶出法中灵敏度最高的一种电化学扫描方式。它是在缓慢线性扫描的电压（5-10 mV/s）上迭加一个振幅为50-100 mV的周期性脉冲，并在刚好加脉冲之前和脉冲的后期分别测量电流，将这两次电流的差值由电子线路放大输出。由于电容电流的衰减速率较法拉第电解电流快得多，在测量电解电流的时刻，电容电流已衰减趋近于零，所以灵敏度较高。通过这一方法可以实现邻苯二酚、对苯二酚的高灵敏检测。 三 、实验仪器与试剂 仪器：CHI660D电化学工作站、三电极工作体系：银-氯化银为参比电极，铂丝为对电极，工作电极为玻碳电极（GCE，d=3mm）。 试剂：对苯二酚、邻苯二酚、PP（磷酸）缓冲液（pH=4.5，7.0）、5.0 mmol/L L-白氨酸溶液。 四、 实验内容 1、电极处理: 玻碳电极先用少量0.05μm的 α-Al2O3 抛光至镜面，然后用二次水清洗待用，同时检查电极表面的清洁度，避免有杂质。 2、修饰电极的制备 将电极放入含有5.0 mmol/L L-LEU的0.2 mol/L PP (pH=7.0)的聚合底液中，采用在扫描速度为100 mV/s, 电位范围为0--2V时，循环扫描聚合5圈，即得到poly-L-LEU/GCE。 3、HQ和CC在修饰电极上的电化学行为 将GCE和poly-L-LEU/GCE分别放入含有1×10-4 mol/L的混合有HQ和CC的溶液中，采用CV法，在扫描速度为100 mV/s, 电位范围为-0.4～0.8 V时，循环扫描1圈，并进行表征。 4、HQ和CC电化学响应标准曲线的绘制： 电解液的配制：配制0.2 mol/L PP缓冲液 (pH=4.5) 100mL。 HQ和CC标准溶液的配制：分别配制0.01mol/L的HQ和CC高浓度储备液，用电解液稀释成不同浓度的HQ和CC标准溶液，浓度依次为：1×10-5 mol/L、2.5×10-5 mol/L、5×10-5 mol/L、7.5×10-5 mol/L、1×10-4 mol/L。 用差分脉冲电化学方法进行测定，以系列标准液的浓度为横坐标，以相应的电流强度为纵坐标绘制标准曲线。 5、精密度和回收率实验 取HQ和CC标准品配置成5×10-5 mol/L的混合液，用差分脉冲法扫描五次，记录其电流值，并求其精密度。采用用标准加入法测定二者的回收率。 6、实际水样中HQ和CC含量的测定及回收率试验 取2.5mL的实际水样，在小烧杯中用PP (pH=4.5.0)缓冲溶液稀释至5mL。在上述相同条件下，测定其电流值，在标准曲线上找出相应电流强度的浓度Cx。采用用标准加入法测定二者的回收率(各加100ul)。 五、结果与分析 1、标准曲线的绘制 表1 HQ和CC标准曲线绘制 编号 1 2 3 4 5 CHQ（μmol/L） I（μA） CCC（μmol/L） I（μA） 以系列标准液的浓度为横坐标，以相应的电流相对强度I值为纵坐标绘制标准曲线。 精密度 表2 精密度试验 编号 1 2 3 4 5 平均值 RSD (%) I（μA，HQ） I（μA，CC） （精密度：RSD = S / ×100% ， ） 回收率 表3 回收率试验 样品 含量 加入量 (μmol/L) 测得值(μmol/L) 回收率(%) HQ CC 实验二 槐花中芦丁与槲皮素的提取分离以及色谱鉴定 （10学时） 一、实验目的 (1) 掌握黄酮苷水解生成苷元的方法及二者之间的分离; (2) 熟悉高效液相色谱仪的基本操作; (3) 掌握液相色谱的操作方法和分析方法，能够通过HPLC分离测定