噬菌体及其进展试题.ppt

简例 蒋鲁岩等用此方法快速检测食品源沙门氏菌，检测灵敏度达10 CFU/100μL;120份食品样品中沙门氏菌的O-I噬菌体检测与生化鉴定结果的阳性率分别为9.17%和10%,符合率为91.7%。表明用荧光标记的O-I噬菌体可以快速、直观、准确、大量地检测食品中沙门氏菌。 3.1.3报告基因检测技术 该技术中，将一个报告基因通过噬菌体插入到目标菌体的D N A 中，随着报告基因的表达，目标菌体便可快速得到检测。 应用在这一技术的报告系统主要有原核生物和真核生物的荧光素酶(lux,luc)基因，细菌冰核蛋白(inaW)基因，E.coliβ- 半乳糖苷酶(lacZ)基因和生物素亲和蛋白。报告噬菌体已经能够成功检测许多菌种，如E.coli,Salmonella.spp 等 。 简介 利用荧光素酶基因作为报告基因的快速检测技术 对于细菌来说，发光机理可用下式表述： F M N H 2+ R C H O + O 2 → F M N + H 2O + R C O O H + h ν(490nm) 反应是在荧光素酶的催化下进行的。细菌的荧光素酶是一个7 7 k D 的二聚体，其中包含α亚基( 4 0 3 7 k D ) 和β亚基(37kD)。 目前，生物发光基因(lux,luc)在报告噬菌体检测技术中应用最为广泛。 Waddell 等利用转座子致突变，将lucA和lucB基因插入到E.col