分子生物学实验指导书..docVIP

分子生物学实验指导书 何华纲 编 江苏大学 食品与生物工程学院 2007年9月 目录 实验一 溶液的配制和器械的准备实验二 质粒DNA的提取与检测实验三 PCR技术扩增目的基因实验四 PCR产物与质粒DNA的酶切分析实验五 目的基因与质粒载体的连接和转化实验 重组质粒的鉴定（综合性实验）实验一 溶液的配制和器械的准备 一、实验目的 ①认识各种常用器械； ②掌握分子生物实验中常用溶液的配制方法； ③掌握高压蒸汽灭菌的方法，了解各种灭菌方法，树立无菌观念； ④掌握微量移液器的使用方法。 二、实验原理 1、溶液的配制与灭菌 （1）溶液浓度的表示 溶液的浓度，常用质量浓度摩尔浓度表示。 质量浓度，?g/?L等单位表示。如抗生素母液常以mg/mL作为浓度单位，DNA或RNA常以?g/?L作为浓度单位。质量百分浓度则是指用百分数（%）表示每100毫升溶液中所含溶质的质量数（g/100mL），如20% SDS，它表示每100mL溶液中含有20g的SDS（十二烷基硫酸钠）。 摩尔浓度，是指每升溶液中所含溶质的摩尔数，即mol/L。如mol/L EDTA，它表示每升溶液中含有摩尔EDTA（乙二胺四乙酸）。另外，mol/L EDTA常常可以写作M EDTA，这里的“M”就相当于“mol/L”。而摩尔数与质量的关系为： 摩尔数=