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A. Overview of the cell cycle Different cell cycle length Biochemical events of cell cycle 染色体数目变异： 染色体组：一个配子的全部染色体（数目，形态结构和一定基因组成的染色体群） 整倍体neuploid：体细胞内含有完整的染色体组的类型 非整倍体aneuploid：染色体组内个别染色体数目有增减，使细胞内的染色体数目不是基数的完整倍数。 多倍体polyploid：每个体细胞含有3个或更多染色体组的个体，3，4，5，6，8倍体 染色体变异 染色体结构变异： 易位translocation：一个染色体上某一区段与另一非同源染色体 上的区段发生互换 缺失deletion：染色体上某一区段及其带有的基因一起丢失 倒位inversion：染色体上某一区段连同带有的基因顺序发生 180度倒转 重复replication：一个染色体上增加了相同的某个片断 Hi ! Take short rest!! 人工染色体的应用 1 物理图谱和定位克隆 2 基因功能鉴定和转基因研究 3 染色体结构与功能关系的研究 4 基因治疗 思考题 1 什麽是染色体工程？动物染色体工程主要包括哪些方面？ 2 动物染色体加倍技术有哪些？比较各自特点和适用对象。 3 何为人工染色体和主要构成元件？讨论其应用现状和发展前景。 Have a good lunch ! YAC的构建 ?酵母人工染色体载体有两个臂，每个臂的末端有一个端粒，而臂上则有着丝粒等染色体必备元件，还有供选择的标记基因；当外源DNA片段连接进两个臂中以后，通过选择标记人们可以从酵母宿主细胞中筛选出重组的人工染色体。 pYAC长约8kb，带有人工染色体所需的一切元件。当要用它进行克隆时，先用BamHI和SmaI对它进行双酶解，回收两个臂，然后平末端的外源大片段DNA就可以两个臂连接，形成真正意义上的人工染色体。 YAC是目前容量最大的载体，可插入100万碱基以上的DNA片段，既可以保证基因结构的完整性，又可以大大减少核基因库所需的克隆数目，从而使文库的操作难度减少。YAC既可以连很长的连续排列的DNA，又可以小到能够方便地通过亚克隆进行DNA序列分析研究，这种特性对于目前正在实施的各种基因组计划意义极大。 ?缺点：插入片段大，稳定性差；插入片段易缺失，使文库不完整；插入片段易重排，造成序列错误；文库中嵌合现象严重。 2 人工诱导雌、雄发育 雌核发育（gynogenesis），俗称假受精，意指精子虽然正常地钻入和激活卵子，但精子的细胞核并未参与卵球的发育，精子的染色体很快消失，胚胎的发育仅在母体遗传的控制下进行。 自然界中一些无脊椎动物和鱼类等存在。 人工诱导雌核发育是指用经过紫外线、X射线或Y射线等处理后的失活精子来“受精”，再在适当时间施以冷、热、高压等物理处理，以抑制第二极体的排出，使卵子发为正常的二倍体动物。 凡雌核发育的个体，都具有纯母系的单倍体染色体组，依赖于卵子染色体组的二倍体化。 雄核发育（androgenesis）是指因经过紫外线、X射线或Y射线处理的卵子与正常的精子受精，再在适当时间施以冷、热或高压等物理处理，使进入卵子内的精子染色体加倍，而发育成为完全为父本性状的二倍体。 雄核发育的个体的生存率非常低，这是由于精子基因型的纯合性、卵子由于照射的损伤和阻止第一次卵裂处理的损伤等原因造成的。 但是仍旧在遗传学基础理论和育种中都有一定的价值，利用雄核生殖的精子可用于冷冻基因库，保存种质资源对基因世代克隆系的建立，不同种间核质的杂种的产生和YY雄性引起的性别控制等也有特殊的意义。 历史 1911年，赫特威氏Hertwig就第一个成功地人工消除了精子染色体活性，并发现了“赫特威氏效应”。 ? 辐射剂量在极限以下，精子和受精胚胎均正常 辐射剂量渐增，胚胎存活率下降 继续增加辐射剂量，回复到正常卵裂 ，胚胎存活率提高。 雌核发育的关键问题 要达到实验性二倍体雌核发育目的，必须解决两个最主要的问题。 第一：人为地使精子的遗传物质失活 第二：阻止雌性个体染色体数目的减少 不同种类的物理辐射包括γ射线（通常用60Co或173Cs）、X射线诱使染色体断裂和紫外光线诱使胸腺嘧啶二聚化和化学药品的处理对精子遗传物质失活和显微手术直接除去受精卵雄性原核。 鉴定方法 鉴别雌核发育的个体，通常以颜色、形态以及生化等方面的指标为依据，也可通过细胞学的研究。 若是雌核发育，其囊胚细胞中只出现一套来自雌核的染色体，否则雌