2009生工科第5章.pptVIP

1、限制性核酸内切酶 2、DNA连接酶 二、核酸基本操作技术 1. CaCl2法制备感受态细胞 2. 电转化法 （三）PCR技术 （2）引物/ Primers RAPD / 随机扩增多态DNA （四）基因组文库 （五）cDNA文库的构建 （六）基因文库的筛选 三、SNP的理论与应用 四、基因克隆技术简介 （一）RACE技术 （二）应用cDNA差示分析法克隆基因 五、蛋白质组与蛋白质组学技术 回文结构： 多克隆位点：（multiple cloning site，MCS） α-互补 质粒的制备流程 ? cDNA文库的构建示意图 蛋白质印迹又称免疫印迹（immunoblotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和定量分析。 (二）蛋白质印迹法 （Western bloting） 蛋白质样品制备 1、蛋白质印迹基本程序 2、蛋白质印迹中用于检测的抗体 3）与生物素偶联的抗体 1）放射性标记的抗体 2）与酶偶联的抗体 1、分子克隆中常用到蓝白斑来筛选重组质粒，其原理和步骤是什么？ 2、用酚抽提DNA时，离心后，为