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第二章 遗传标记 本章主要内容 形态标记 细胞学标记 生化标记 分子标记 即植物的外部形态特征。主要包括肉眼可见的外部特征,如:矮秆、紫鞘、卷叶等;也包括色素、生理特性、生殖特性、抗病虫性等有关的一些特性。 优点:形态标记简单直观、经济方便; 缺点:(1)数量在多数植物中是很有限的;(2)且多态性较差,表现易受环境影响,(3)有一些标记与不良性状连锁。(4)形态标记的获得需要通过诱变、分离纯合的过程,周期较长。因此形态标记在作物遗传育种中的作用是有限的。 (一)、形态标记的应用 张庆勤等在对燕麦与节节麦、黑小麦的杂交的研究中,根据杂种后代小穗着生的部位,芒的生长位置,从形态上验证了在杂种F1 植株中存在有燕麦的特征性状。 田崎通过对来自不同地方的120个小豆品种进行的调查发现,根据分枝性、主茎的坚实度及柔软度、主茎基部粗度、最长分枝的长度等4项指标,可以把小豆株型按照其指数分成A、B、C、D这4个基本类型。 任刚通过对黄瓜属种间杂交新种的形态学研究表明,杂交新种自交一代各个单株除了在节间长和侧枝数上有差异之外,其他方面均没有差异。 (二)应用实例 1)具有代表性的三种锦鸡儿的形态学观察 2)不同棉花材料的形态学观察 (亚比棉×陆地棉 )杂种F1与其亲本的形态特征比较 (亚比棉×海岛棉)杂种F1与其亲本的形态特征比较 即植物细胞染色体的变异:包括染色体核型(染色体数目、结构、随体有无、着丝粒位置等)和带型(C带、N带、G带等)的变化。 与形态标记相比,细胞学标记的优点是能进行一些重要基因的染色体或染色体区域定位。但细胞学标记材料需要花费较大的人力和较长时间来培育,难度很大;同时某些物种对染色体变异反应敏感;还有些变异难以用细胞学方法进行检测。因此到目前为止,真正应用于作物遗传育种研究中的细胞学标记还很少。 (一)核型和核型分析定义 1 核型----一般是指体细胞染色体在光学显微镜下所有可以测定的表型特征的总称。 主要包括染色体的数目与形态结构特征两大方面的内容。染色体的数目包括染色体的基数、多倍体、非整倍体、B-染色体(B染色体)超数染色体,是存在于许多有机体中的额外染色体及染色体断片)。染色体的形态主要包括染色体的绝对大小和相对大小、着丝点和次缢痕以及随体的数目和位置等特征。 2.核型分析:核型分析就是指对核型的各种特征进行定量和定性的表述。核型分析是分析染色体数目和结构变异的基本手段之一。它在杂种细胞的染色体研究和基因定位,单个染色体的识别等方面具有重要意义。 什么是染色体分带技术 特殊的染料、染色方法,使同一染色体的不同区段呈现不同的染色效果-带型,各种分带技术C、G、Q、R、N的出现,为染色体的精确鉴别提供了一条崭新的途径。 Eg 蚕豆的核型分析 (二)核型分析的应用 1.核型分析应用于植物的分类研究 2.核型分析应用于探讨物种的起源 3.核型分析应用于外源染色体的检测与验证杂种的真实性 (三)核型分析内容 核型分析主要包括两个方面的内容: 一个是染色体的数目, 另一个是染色体的形态。 (四)核型分析的方法 1.取材 观察染色体的适宜的材料的选取:凡是能进行细胞分裂的植物组织和单个细胞都可以作为观察染色体的材料,比如像一些植物的顶端分生组织(根尖和茎尖)、居间分生组织、愈伤组织和胚乳、大小孢子母细胞的减数分裂时期等等。但是并不是随时取来的材料都可以用。各类材料有自己的特点及取材操作的注意事项。可以采用种子萌发取根,鳞茎水培取根,扦插取根和植株上直接取根等等。一般常用根尖作为材料。对于那些难萌发的种子或有植株无种子的材料可以用茎尖进行染色体压片. 2.预处理 进行预处理的目的主要是(1)防止纺锤体的形成,因为没有了纺锤体的牵引,就会使的细胞分裂被迫处于中期阶段,从而能够获得很多的中期分裂相。(2)材料经过预处理后,就会引起染色体的收缩,使得染色体能够缩短,这样有利于通过压片,使得染色体很好的分散开。 1)固定目的:主要是利用化学药物能迅速杀死细胞,从而使得蛋白质变性和沉淀,并能尽量保持各种结构的原有状态。 2)固定液:主要使用的固定液是卡诺固定液(1:3的冰乙酸和无水乙醇) 3)固定所需要的时间:2—24小时,小材料,固定的时间应短一些,而对于大一些的材料,则固定的时间可以长一些。 4)固定所需要的温度;一般固定是在低温冰箱里,但这并不是必需的条件。 5)保存;经过固定后的材料可以保存在70%的酒精中待用。 4.解离 1)解离的目的:为了方便压片,对于根尖和茎尖等体细胞组织,需经过某些处理,以除去细胞之间的果胶层并能使细
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