基因工程考工试重点.docVIP

名词解释 质粒（plasmid）：是一类存在于细菌和真菌细胞中能独立于染色体DNA而自助复制的共价、闭合、环状DNA分子（covalently closed circular DNA）,也称为cDNA，其大小通常在1-100kb范围内。 DNA连接酶（DNA ligase）：广泛存在于各种生物体内，其催化的基本反应形式是将DNA双链上相邻的3羟基和5磷酸基团共价结合形成3,5–磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来，因此它在DNA复制、修饰以及体内体外重组过程中起着重要作用。 限制性核酸内切酶的星号活性：第Ⅱ类限制性核酸内切酶虽然具有特异性的识别序列及切割位点，但当酶解条件发生变化时，酶切反应的专一性可能会降低，导致同种酶识别多种序列，这种现象称为限制性核酸内切酶的星号活性。 接合(conjugation)：是指通过细菌细胞之间的直接接触导致DNA从一个细胞转移至另一个细胞的过程。这个过程是由结合型质粒完成的，它通常具有促进供体细胞与受体细胞有接触的接合功能以及诱导DNA分子传递的转移功能，两者均由结合型智力上的有关基因编码。 转化率：是转化（包括感染）效率的评估指标，通常由两种形势表征转化率。一是在待转化DNA分子数大于受体细胞数的条件下，转化细胞与细胞总数之比。转化率的另一种表示形式是在受体细胞相对待转化DNA分子数大大过量时，每微克DNA转化所产生的克隆数。 正选择：载体遗传标记法的原理是利用载体DNA分子上所携带的选择性遗传基因筛选转化子或重组子。由于标记基因所对应的遗传表型与受体细胞是互补的，因此在培养基中施加合适的选择压力，即可保证转化子显现（长出菌落或噬菌斑），而非转化子隐去（不生长），这种方法称为正选择。 鸟枪法：将某种生物体的全基因组或单一染色体切成大小适宜的DNA片段，分别连接到载体DNA上，转化受体细胞，形成一套重组克隆，从中筛选出含有目的基因的期望重组子。 基因文库（gene library或gene bank）：是指某一特定生物体全基因组的克隆集合。基因文库的构建就是将生物体的全基因组分成若干DNA片段，分别与载体DNA在体外拼接成重组分子，然后导入受体细胞中，形成一整套含有该生物体全基因祖DNA片段的克隆，并将各克隆中的DNA片段按照其在细胞内染色体上的天然序列进行排序和整理，因此某一生物体的基因文库实质上就是一个基因银行。 包含体：在某些生长条件下，大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子，他们致密地集聚在细胞内。或被膜细胞或形成无膜裸露结构，这种结构成为包含体（inclusion bodies，IB）。 潜伏期：当细菌接种到无菌培养基后，在一段时间内细菌数量并不会立即增加，这个阶段称为潜伏期。细菌在此期间主要是适应新的环境条件，包括诱导表达原来处于关闭状态的代谢途径，合成营养物质代谢所需的运输蛋白和相关酶系等。潜伏期的长短首先取决于用于发酵接种的细菌菌龄，其次也与种子培养基和发酵培养之间的差别大小有关。 酵母: 是一群以芽殖或裂殖进行无性系列的单细胞真核微生物，分属于子囊菌纲（子囊菌酵母）、担子菌纲（担子菌酵母）、半知菌类（半知菌酵母），共由56个属和500多个种组成。 转基因技术：所谓的转基因通常是指在DNA操作过程中整合到动植物受体细胞染色体上的外源基因。为了使外源基因在动植物体内稳定展现出相应的生物学表型，必须采用转基因的重组子构建技术、重组分子导入动植物体内的转化技术、转基因在受体细胞染色体上的稳定整合及可控型表达技术，这些技术统称为转基因技术。 转基因生物制品：含有转基因并为其遗传修饰了的动植物发育个体则称为转基因生物制品。 基因：从化学上来说，指的是一段DNA或RNA顺序，该顺序可以产生或影响某种表型（genotype，phenotype），可以由于突变生成等位基因变异体（体细胞父源和母源；正常和突变基因）；从遗传学上来说，基因代表一个遗传单位，一个功能单位，一个突变单位。 15.同裂酶与同尾酶：同裂酶（isoschizomer）：在II型限制性内切核酸酶中，来源不同而识别序列和切割方式均相同者称为同裂酶。不同同裂酶对位点的甲基化敏感性有差别。同尾酶（isocaudamer）：在II型限制性内切核酸酶中，虽来源及识别序列不同，但DNA经其切割后能形成相同粘性末端者。如BamH I 、BclI、BglII和Xho I 是一组同尾酶。 注 意： 由同尾酶产生的粘性末端序列很容易重新连接，但是两种同尾酶消化产生的粘性末端重新连接形成的新片段将不能被该两种酶的任一种所识别。 16. 探针与核酸分子探针 探针(probe)，是指在化学与生物学意义上能够与特定的靶分子发生特异性相互作用，并可被特殊的方法探知的分子。抗体-抗原、生物素-抗生物素蛋白、生长因子-受体的相互作用都可以看作是探针与