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第二节 原核生物的转录过程 （The Process of Protokaryotic Transcription） RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。 一、转录起始需要RNA聚合酶全酶 转录起始需解决两个问题： 原核生物的转录起始 过程： 1.RNA聚合酶全酶 与模板结合。 (?2????) ? σ亚基识别辨认启动子-35区 全酶与启动子-10区结合 –35 –10 TTGACA AACTGT TATAAT ATATTA 闭合转录复合体（DNA维持双螺旋结构） 原核生物的转录起始 2.DNA双链解开, 　 -10区开螺旋， 启动转录。 （??） ? 　 　 　 过程： DNA＋ RNA pol全酶 开放转录复合体（DNA局部解链） (20bp) 原核生物的转录起始 3.RNA聚合酶催化第一次聚合反应。 ? ? 5′ -pppGpN – OH + ppi RNApol - DNA - pppGpN- OH 起始复合物: 5′-pppG -OH + NTP （?、?） (?2????) 过程： 5′端第一位多为嘌呤核苷酸（GTP或ATP） 进入延长阶段 原核生物的转录起始 过程： 1.RNA聚合酶全酶与模板结合。 3.RNA聚合酶催化第一次聚合反应。 2.DNA双链解开,启动转录。 (?) (??) (?、?) 原核生物转录起始复合物 闭合转录复合物 开放转录复合物 延长阶段 ？ ? 　 　 　pppGpN - OH ppi ? pppG ＋NTP ppi 　RNApol - DNA - pppGpN- OH 原核生物转录起始复合物 原核生物的转录起始 二、 转录延长 ２.? 亚基脱落，RNA聚合酶核心酶变构， 　　　　与模板结合松弛，沿着DNA模板前移。 原核生物 1.当第一个磷酸二酯键形成后，σ亚基即脱落 　并可循环使用，而RNA pol全酶转变为核心酶。　 (3??5?) ? α:β:β′:σ =4000 : 2000 : 2000 : 600 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi ３.在核心酶作用下， 　　NTP不断聚合， 　　RNA链不断延长， 　　形成转录泡（转录空泡）。 转录泡:　核心酶+DNA模板+RNA产物 (5? ?3?) 5? 3? (12bp) (20bp) 转录泡 : RNA-pol (核心酶) ···· DNA ···· RNA -10区 -35区 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 三、 转录终止 ------ RNA聚合酶在DNA模板上停止前进， 　　　转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来 1. 依赖 ρ 因子（Rho) 的转录终止 2. 不依赖 ρ 因子的转录终止 原核生物 三、 转录终止 ------ RNA聚合酶在DNA模板上停止前进， 　　　转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来 1. 依赖 ρ 因子（Rho) 的转录终止 2. 不依赖 ρ 因子的转录终止 原核生物 原核生物的转录终止 1. 依赖 ρ 因子（Rho) 的转录终止 　　ρ 因子是一种能控制转录终止的 六聚体蛋白质，又称终止因子。 结合RNA，与poly C结合力最强 　　　　　与poly d C／ d G最弱 ATP酶活性 解螺旋酶活性 结构基础：产物RNA 3′末端丰富的Ｃ。 ρ因子 （转录终止信号） A T P 富含C碱基 结构基础： 　　DNA模板上靠近终止处，有特殊的碱基序列， 　　相应的，RNA产物3?末端形成特殊结构终止转录。 2. 不依赖 ρ 因子的转录终止 原核生物的转录终止 特殊的碱基序列： 特殊结构: １. RNA产物3?末端多聚Ｕ。 ２. 接近终止区有逆向互补碱基序列。 茎环结构或发夹结构 原核生物的转录终止 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGACUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGACUUUUU... 3` RNA 5`TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3` DNA 或 UUUU...….