第05章__利用酵母菌生产蛋白质.pptVIP

（3） 真核细胞与原核细胞的蛋白质分泌途径 在原核生物中，可分泌蛋白质是由N末端信号序列控制合成的，然后通过细胞膜上的“SecY-SecD-SecE-SecF”组成的蛋白质复合物分泌出去。 在酵母菌中，分泌蛋白的信号序列为信号识别颗粒（SRF）所识别。SRF包含6种蛋白质分子，并由一个小的RNA分子将其串连在一起。通过SRF与其在膜表面上的受体之间的识别与结合，引导新生蛋白到达蛋白质的输出结构，该结构位于粗糙内质网的特异性位点上。 （4） 安全性 在原核生物中LPS的产生。LPS的毒性； 酵母菌：细胞组分和代谢物对人体是安全的。 ③ 含有一段长度为599 bp的反向重复序列。该序列将该质粒分成2部分，每一部分均含有一个启动子和该启动子控制下的2个基因，其中一个基因称为FLP，编码一个位点特异性的重组酶（recombinase）。 2 ?m质粒结构示意图 2 ?m质粒的进一步改造： ① 酵母菌-大肠杆菌穿梭质粒（YEp）：加入部分酵母菌核DNA序列和大肠杆菌的质粒复制子； ② 位点特异性重组质粒载体：将E. coli的DNA插入到重组酶识别序列的正向重复序列中，经过重组后该序列可以被丢失。 带polyA序列的磷酸甘油醛 脱氢酶终止子 磷酸甘油醛脱氢酶启动子 外源蛋白 筛选标记