【2017年整理】比较动植物细胞培养条件.docxVIP

动 植 物 细 胞 培 养 条 件 的 比 较  动植物细胞培养条件的比较 动植物细胞的培养是细胞工程中非常重要的环节，在培养动植物细胞的过程中，培养条件有相似之处，但也有各自特殊的地方。下面，先就培养条件的不同之处进行比较： 一、培养基 植物细胞培养基一般为合成培养基，多为固体培养基，成分主要有无机营养、碳源、维生素、植物生长物质和有机附加物等。 表1 植物培养基成分及作用 种类 成分 成分种类 作用 无机营养物 大量元素： C ，H，O ，N, P, K, Ca, S ，Mg 1.成为结构物质的组分2.参与代谢3.维持生物电化学平衡4.影响器官建成 微量元素： Fe, Mn ,Cu, Zn, B，Mo，Cl 有机营养物 有机碳源 蔗糖、果糖、葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、甘露醇、乳糖 影响营养状况、细胞分化、渗透压 有机氮源 维生素：硫胺素、吡哆素、烟酸、泛酸钙、腺嘌呤、生物素、叶酸、Vc 以辅酶形式参与代谢，促进对组织的生长和分化，0.1-10mg/l 肌醇 促进糖类转化、维生素和激素的利用，促进胚状体和愈伤组织的生成50-100mg/l 氨基酸：甘氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、半胱氨酸 生物大分子的组分，缓冲作用和调节体内平衡，促进不定芽、不定胚的分化，1-3mg/l 复合成分 辅助作用 生长调节物质 生长素 IAA:吲哚乙酸 IBA:吲哚丁酸 NAA：萘乙酸 2,4-D：2,4-二氯苯氧乙酸 1.促进根的分化 2.促进愈伤组织生成 3.促进体细胞胚发生 4.与CTK结合影响形态建成 用量：0.1-10mg/l 细胞分裂素 KT：激动素 BAP：苄氨基嘌呤2iP：异戊烯腺嘌呤 zt ：玉米素 1.促进细胞分裂，茎的增殖 2.诱导芽的分化 3.与生长素结合影响形态建成 用量：0.1-10mg/l 赤霉素 GA3 1.促细胞伸长生长 2.刺激体胚发育 3.影响形成层分化 4.对生长素和CTK有增效作用 乙烯 1.果实成熟、组织老化 2.抑制体胚发生 水（95%） 溶剂 生命活动的基本成分 其他成分 琼脂 琼脂并不是培养基必要的成分 对培养物起到支持作用 使用浓度0.6-1.0%。 活性炭AC 吸附剂 防止褐化 促进形态发生 类似土壤的效果 0.5-10g/ L 动物细胞培养基包括天然培养基和合成培养基，可为固态，也可为液态，成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等，此外，动物细胞培养还需要各种培养液。 表2 动物细胞培养基基本营养成分 成分 种类 分类 作用 水 三蒸水、超纯水 C源 葡萄糖 谷氨酰胺 提供主要能源 合成其他物质的原料 氨基酸 12种必需氨基酸 非必需氨基酸 蛋氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、赖氨酸、组氨酸、酪氨酸、精氨酸、胱氨酸 甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸等 蛋白质的基本组分 谷氨酰胺 促进各种氨基酸进入细胞膜、N源、C源 维生素 水溶性维生素 生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、比多醇、核黄素、硫胺素、 Vb12、Vc 提供辅酶辅基 脂溶性维生素 血清补充 无机离子 钠 供给形式：Nacl、NaHCO3、NaH2PO4、Na2HPO4 维持渗透压和胞内外物质的转运 氯 Nacl、Kcl 、Cacl2 渗透压 钾 供给形式：Kcl 镁 供给形式：MgSO4 促进贴壁 钙 供给形式：Cacl2 维持细胞膜的坚固和渗透性； 保持神经和肌肉组织的正常兴奋性； 促进脱氢酶活性； 促进细胞粘附性 磷 供给形式：HPO42-、H2PO4- 参与基本物质代谢； 合成ATP的组分； 维持酸碱平衡 碳 NaHCO3、CO2 维持酸碱平衡 微量元素 Fe、Zn、Se、Cu、Mn、Mo等 与有机化合物结合 激素和生长调节因子 促进细胞生长、维持细胞功能、保持细胞的分化状态 血清：原代培养或细胞生长状况不良时，是基本添加物（5-20%v:v） 含有基本营养物质 含有生长调节因子和激素 含有促进贴壁的生长基质成分（纤维连接蛋白） 含有载体蛋白（白蛋白、转铁蛋白） 含有抗机械损害的非特异性保护物质 含有中和毒性物质（白蛋白） 提供蛋白酶抑制剂 提供良好的缓冲系统 其他成分 核酸降解物 嘧啶、嘌呤 抗氧化剂 谷胱甘肽、抗坏血酸 二、营养要求 根据动植物细胞培养基的不同，我们可以看出，动植物细胞对培养基的营养要求有所不同。 植物细胞培养基根据无机盐成分可分为： （1）富盐平衡培养基（MS、 LS、BL、BM）：无机盐浓度高，离子平衡性好，具较强缓冲性；营养丰富，无需额外添加复杂有机成分；微量元素种类多，浓度高。 （2）高硝态氮培养基（B5、N6）：硝酸钾含量高；铵态氮含量低；含有较高的VB1。