第十二章第一节抗生素类药物范例.ppt

第十二章 生物药物的一般生产工艺 第一节 抗生素类药物 世界及中国抗生素工业的历史和现状 2、我国抗生素生产企业 华北制药集团有限责任公司、 哈药集团、 石家庄制药集团有限公司、 山东鲁抗医药股份有限公司 青霉素生产流程 青霉素发酵下游提取工艺 转鼓式真空过滤机 碟片离心机 多级逆流萃取流程 链霉素的发酵工艺 四环素生产工艺 红霉素的生产工艺 1、结构 红霉素是由红霉内酯与去氧氨基己糖和红霉糖缩合而成的碱性苷。 2、物理性质 溶解特性： 红霉素碱易溶于有机溶剂，不甚溶于水 红霉素是一个碱性化合物，能和无机或有机酸类形成盐类。盐类在水中溶解度较大 溶解度： 红霉素在水中的溶解度是随温度增高而减少，以55℃时为最小，因此工业上利用此性质加温至45～55℃并保温，使红霉素碱从水中析出结晶。 红霉素的生产工艺 二、发酵工艺及其控制要点 三、提取和精制 (5)温度控制 一般前期25—26℃，后期23℃以减少后期发酵液中青霉素的降解破坏。 (6)通气与搅拌 抗生素深层培养需要通气与搅拌，一般要求发酵掖中溶解氧量不低于饱和情况下溶解氧的30%。通气比一般为1：0.8VVM。搅拌转速在发酵各阶段应根据需要而调整。 (7)泡沫与消沫 在发酵过程中产生大量泡沫。可以用天然油脂如豆油、玉米油等或用化学合成消沫剂“泡敌”(环氧丙烯环氧乙烯聚醚类)来消沫。应当控制其用量并少量多次加入，尤其在发酵前期不宜多用。否则，会影响菌的呼吸代谢。 E 过滤 青霉素发酵液过滤宜采用鼓式真空过滤器，如采用板框压滤机则菌丝常流入下水道而影响废水治理。且劳动强度大，并对环境卫生不利。过滤前加去乳化剂并保温。 F 提炼 采用溶媒萃取法。将发酵滤液酸化至PH久后加相当于发酵滤液体积1/3的醋酸丁酯(简称BA),混合后以碟片式离心 机分离。为提高萃取效率将两台离心机串连使用， 进行二级对向逆流萃取。得一次BA提取液。然后以1.3%—1.9%NaHCO3在pH6.8—7.1条件下将青霉素从BA提取到缓冲液中。然后调pH至2.0后，再一次将青霉素从缓冲液转入到BA中去，其方法同上。得到二次BA提取掖。 G 脱色 在二次BA提取液中加活性炭150一300g／10亿单位，进行脱色、过滤。 H 共沸蒸馏或直接结晶 鉴于以丁醇共沸结晶法所得产品质量优良，国际上较能遍采用此法生产注射品。其简要流程如下：将二次BA萃取液以0.6mol／LNaOH液萃取，调pH至6.4—6.8。得青霉素钠盐水浓缩液(5万单位／mL左右)，加3—4倍体积丁醇，在16—26℃，3—10mm汞柱下真空蒸馏，将水与丁醇共沸物蒸出，并随时补加丁醇。当浓缩到原来水浓缩液体积、蒸出馏分中含水达2%—4%时，即停止蒸馏，青霉素钠盐结晶析出，过滤。将晶体洗涤后进行干燥得成品。可在60℃，20mmHg柱，真空中烘16小时，然后磨粉，装桶。 其他结晶法为采用BA提取液，共沸蒸馏或加醋酸钾至BA提取液中结晶。如采用严格质量措施，采用上述其它结晶法时亦能达到较优产品。 活化 孢子培养 25℃ 6~7d 孢子培养 25℃ 6~7d 种子培养 25℃ 40~45h 种子培养 25℃ 13~15h 发酵 22~26℃ 6~7d 冷却至15℃ 斜面 母瓶 大米 孢子 一级 种子罐 二级 种子罐 发酵罐 放罐 下游 提取 冷冻管 过滤 提取 脱色 结晶 采用转鼓式真空过滤机，去除菌丝及发酵液中不溶物 酸化至pH2，加发酵液体积1/3的醋酸丁酯(BA)，混合后以碟片离心机分离，进行二级逆流萃取。后以NaHCO3调pH至6.8~7.1，再转提至BA 按150~300 g/10亿单位青霉素　加入活性炭，脱色过滤 以NaOH调pH至6.4~6.8，加3~4体积丁醇，16~25℃,5~10mmHg真空共沸蒸馏蒸馏，结晶过滤、洗涤、干燥(60℃,20mmHg)磨粉 发酵液预处理后 溶媒回收 成品检验 混合分离器1 混合分离器2 混合分离器3 混合分离器n 料液 产物 溶剂 萃余液 萃余液 萃余液 废液 溶剂 萃取器 分离器 回收器 产物 溶剂 料液 产物 废液 萃取相 溶剂 化工厂的立式传质塔及塔板 (4) 前体 在抗生素生物合成中，菌体利用它以构成抗生素分子中的一部分而其本身又没有显著改变的物质，称为前体(precursor)。前体除直接参与抗生素生物合成外，在一定条件下还控制菌体合成抗生素的方向并增加抗生素的产量。如苯乙酸成苯乙酰胺可用作为青霉素发酵的前体。丙醇或丙酸可作为红毒素发酵的前体。前体的加入量应当适度。如过量则往往前体有毒性，并增加了生产成本。如不足，则发酵单位降低。 此外，有时还需要加入某种促进剂或抑制剂，如在四环素发酵中加入M-促进剂和抑制剂溴化钠，以抑制金