进修实习生细菌鉴定药敏仪小讲座1..doc

细菌纯分及上机（vitek2 compact系统） 一、细菌鉴定和药敏检测流程： 初鉴→纯分→选卡→菌悬液配制及稀释: B群链球菌，无乳链球菌CAMP（+） 耳鼻喉科分泌物：有正常菌群，流感嗜血杆菌，金葡菌，肺炎链球菌需处理；而奈瑟氏菌，α溶血链球菌等不处理 伤口分泌物：骨科和皮肤科采集时，有可能没有进行表皮消毒，培养出凝固酶阴性的葡萄球菌时，需商榷，不一定全部处理。 咽拭子：A群β溶血链球菌，化脓链球菌 痰：（+）金葡，β溶血链球菌，肺炎链球菌，纹带棒状杆菌 （-）全部阴性杆菌3+，卡他阴性双球菌 大量真菌3+ 2、细菌纯分： 目标菌株作鉴定和药敏测试前需传代纯分培养18-24h后（新鲜菌）取单个菌落上机。 3、vitek2 compact系统 3.1、工作原理 该系统主要由以下几部分组成：样本处理工作站（SCS）、一体化自动装置（最大处理容量为60个试验卡）、精密电子数码比浊仪。仪器采用单一扫描微量生化鉴定比色法，15分钟连续扫描，与内存曲线斜率比较判断结果。药敏测定以定量MIC为基础，以MIC分布为分析依据，具有强大的专家系统，包括2000多种耐药表型、20000多个MIC分布柱状图和完善的统计分析100000篇参考文献。鉴定卡： GN 革兰阴性杆菌鉴定卡 GP 革兰阳性球及部分革兰氏阳性杆菌鉴定卡 YST 酵母菌鉴定卡 NH 革兰阴性杆菌鉴定卡 ANC 革兰阳性杆菌鉴定卡 药敏卡： AST-GN13GN09 革兰阴性杆菌药敏卡AST-GP67 革兰阳性球菌药敏卡 菌悬液配制及稀释:悬浮液0.45% NaCL液，PH 5.5-7.2 菌悬液浓度 ： GN 0.5 - 0.63MCF GP 0.5 - 0.63 MCF NH 2.7 - 3.3 MCF ANC 2.7-3.3 MCF YST 1.8 - 2.2 MCF 药敏卡 AST-GN 3.0ml 盐水 + 145μl菌悬液 AST-GP 3.0ml 盐水 + 280μl菌悬液 注意：所有悬浮液开封后有效期为一个月，为避免污染，盐水分装器夜间必须置于冰箱（2℃ - 8℃）。 5、上卡：使用前将卡片和盐水瓶从冰箱取出，放室温15-20分钟，充分复温，将卡片按顺序放在载卡架上，输样管插入到菌液管中。药敏卡应放在配对鉴定卡的后面。 6、纯度实验：用上机后的鉴定卡或者药敏卡的输液管直接在血平板上接种划线，第二天观察所长出的细菌是否为纯菌。 7、结果处理： 1）鉴定结果：鉴定卡的结果一般仅给出单一结果，无需进行补充试验，电脑 主机VITEK 2 compact程序浏览结果时，可给出结果的可信度评估；如果给出两个及两个以上结果，仪器会做出提示或要求进行补充试验，请按注释进行补充试验，选择正确的鉴定结果；不能鉴定或无法确定的结果，请查找原始分离平板或做纯度实验的平板，确认所分离细菌是否为纯培养，必要时重新分离并重新进行鉴定试验。 2）药敏结果：如果同时进行鉴定和药敏试验，细菌鉴定结果会自动加到药敏卡 上；否则需手工添加细菌名称到药敏卡信息中；如果有专家系统评语出现，则应按操作规程对药敏结果作适当的修改并确认最终结果。 注：仪器检测几种状态 -鉴定或药敏实验正在进行中 -需进行补充实验 -操作者确认分离株信息，并点击review -结果处理完成 二、vitek2 compact仪简介 生物梅里埃生产的vitek系统，第一代vitek系统包括（vitek-AMS32、60、120、240），第二代vitek2 compact。采用八进位制数码鉴定及动态鉴定的原理，每个用于鉴定的测试卡内有30项反应，每3个反应为一组，将各组反应结果相加，30项反应可得一组10位数的数码。由计算机控制的读数器，每间隔一定时间对各反应孔底物进行光扫描，并读数一次，动态观察反应变化，获得当时的待检细菌的生化反应谱和生物编码，当生长对照孔透光度到达终点阈值时，则指示此卡已完成反应，系统以此时各孔的反应值作为判断依据，组成数码并与数据库中标准菌的生物模型相比较，获得相似系统鉴定值，得出鉴定结果。动态鉴定是利用细菌最佳时间段生物特征作为鉴定依据，所以会比传统鉴定时间短，报告速度更加快捷。 第二代与第一代分析仪的差别： 速度更快，每一卡由60min读数一次改为每15min读数一次。 自动化程度更高，不需手工写号，自动废弃完成的卡片。 3）含PK/PD的高级专家系统，使药敏结果更符合体内疗效。 4）根据细菌生长速度，有4种不同药敏分析