实验二 培养基的制备[精选].pptVIP

1.取水500mL，加热； 2.按照配方称取各物品加入水中，边加热边搅拌，快沸时注意不要溢出，沸腾后停止加热；冷却至室温； 牛肉浸膏 3.75g 蛋白胨 7.5g 氯化钠 3.75g 磷酸氢二钾 0.375g 补足水量至750mL 3. 用pH试纸测定pH并调至7.2-7.6。 若pH7.6，则用0.1mo1/L HCl调低; 若pH7.2，则用0.1mol/L NaOH调高. 4. 调好pH值后，各自再补足水量，再测pH值。 将6支做厌氧培养基（共约30ml），200ml装入小盐水瓶；取20ml再配0.4%琼脂的半固体培养基6支；余下500ml加2%（10g琼脂）继续加热至充分融化，固体培养基中倒6支斜面，其余加入盐水瓶。 今天实验内容/每组： * * 1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分，可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。 　①天然培养基 是指利用各种动、植物或微生物的原料，其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有：牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分，但一般来讲，营养是比较丰富的，微生物生长旺盛，而且来源广泛，配制方便，所以较为常用，尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。 　②合成培养基 是一类化学成分和数量完全知道的培养基，它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强，但价格昂贵，而微生物又生长缓慢，所以它只适用于做一些科学研究，例如营养、代谢的研究。 　③半合成培养基 在合成培养基中，加入某种或几种天然成分；或者在天然培养基中，加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。这种培养基在生产实践和实验室中使用最多。 2、根据培养基的物理状态来区分，可以分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。 ①液体培养基 所配制的培养基是液态的，其中的成分基本上溶于水，没有明显的固形物，液体培养基营养成分分布均匀，易于控制微生物的生长代谢状态。 ②固体培养基 在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。常用作凝固剂的物质有琼脂、明胶、硅胶等，以琼脂最为常用。固体培养基在实际中用得十分广泛。在实验室中，它被用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等。 ③半固体培养基 如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中，就制成了半固体培养基。以琼脂为例，它的用量在0.2~1%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力，有时用来保藏菌种。 3、根据培养基的用途来区分，可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。 ①选择培养基 在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。如链霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生长；而制霉菌素、灰黄霉素等能抑制真核微生物的生长；结晶紫能抑制革兰氏阳性细菌的生长等。 ②增殖培养基 在自然界中，不同种的微生物常生活在一起，为了分离我们所需要的微生物，在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基，这种培养基常用于菌种筛选和选择增菌中。在某种程度上讲，增殖培养基也是一种选择培养基。 ③鉴别培养基 在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。 有些培养基是具有选择和鉴别双重作用。 例如： 食品检验中常用的麦康凯培养基是一例。它含有胆盐、乳糖和中性红。胆盐具有抑制肠道菌以外的细菌的作用（选择性），乳糖和中性红（指示剂）能帮助区别乳糖发酵肠道菌（如大肠杆菌）和不能发酵乳糖的肠道致病菌（如沙门氏菌和志贺氏菌）。 另外： 根据培养基的营养成分是否“完全”，可以分为基础培养基、完全培养基和补充培养基，这类术语主要是用在微生物遗传学中。 根据培养基用于生产的目的来区分，可以分为种子培养基和发酵培养基。还有专门用于培养病毒等寄生微生物的活组织培养基，如鸡胚等；专门用于培养自养微生物的无机盐培养基等。 实验二 培养基的制备 一、目的要求 1. 掌握培养基制备的原则； 2. 掌握培养基的制备方法。 二、实验原理 1、培养基的概念？ 培养基是指由人工方法配合而成的营养基质，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和