本科答辩绪论.pptVIP

主要内容 前言 研究目的与意义 实验的主要材料与内容 实验结果 实验的结论 一、前言 沙门氏菌是世界范围内最为重要的人畜共患病病菌之一，它不仅对养鸡业的影响颇深，也是引起北京甚至是全球的食源性疾病的重要致病菌之一。 我国养殖业规模及禽产品的消费量都越来越来大，使得人畜感染沙门氏菌的机会大大增加。因此，不论是个人还是国家都应该重视对沙门氏菌的防控，并且要继续研制出安全、有效以及快速的检测方法。我相信随着科学水平的进步，我国的养禽业也一定会稳步发展起来的。 二、研究目的与意义 据报道，北京地区沙门氏菌的流行性研究数据并不完善，所以调查沙门氏菌在北京地区肉鸡场的流行性情况就更加重要。此次课题就是为了研究对北京地区的肉鸡场的沙门氏菌流行情况以及分子分型情况。并且对该地区鸡源沙门菌的流行情况做近一步的调查分析，构建北京地区鸡源沙门氏菌的分子分型数据库，为临床用药提供一定依据，为后续的生态学控制策略的制定奠定基础。 三、实验的主要材料与内容 沙门氏菌PCR鉴定结果 PCR鉴定法扩增的invA基因，其得到的扩增长度应在284bp处出现目的片段。 2、沙门氏菌基因分型的结果 五、实验的讨论 本实验的结果说明了北京地区肉鸡场流行的沙门氏菌以肠炎和Tennessee型沙门氏菌为优势血清型，并且沙门氏菌的流行性与地域之间存在着一定的相关性，即不同地区流行的沙门氏菌菌株可能存在差异。 基因分型结果说明了北京地区肉鸡养殖场有3种主要沙门氏菌存在的PFGE 型别较多, 各菌株间亲缘关系较远, 在同种沙门氏菌间相似性系数最小值为8.9%, 说明3种主要沙门氏菌均未显示流行趋势。 * * 北京农学院动物科学技术系2008级学士论文答辩 沙门氏菌在北京地区流行性的调研 指导教师：李秋明 学生：袁欣 二零一三年六月 场名 样品数 样品来源 1号场 50 华都延庆（曹建启） 2号场 44 平谷区（董建峰） 3号场 43 大兴区（张爱中） 4号场 63 门头沟（艾红刚） 5号场 50 房山区（连青举） 6号场 50 房山区 (孟令会） 7号场 50 延庆（邦艳红） 8号场 50 延庆（赵玉武） 9号场 150 正大肉鸡孵化场 10号场 240 华都肉鸡孵化场 1、样品采集情况 2、实验主要材料 2.1 实验主要试剂 Na2EDTA·H2O、Premix Ex Taq、Tris、Gold View、DNA Maker DL 1000、沙门氏菌显色培养基(第二代)、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）、沙门氏菌诊断血清、十二烷基肌氨酸钠、十二烷基硫酸钠（SDS）、蛋白酶K、PFGE专用琼脂糖、EB 存储液（10mg/ml）、Xba I 限制性内切酶 2.2 实验主要器械 高速离心机、超净工作台、电热恒温培养箱、PCR仪、电泳仪、凝胶成像仪、细菌浊度仪、恒温水浴锅、恒温水浴摇床、脱色摇床、CHEF-DR III型脉冲场凝胶电泳仪、CHEF MAPPER脉冲场凝胶电泳仪 3、实验的主要内容 鸡泄殖腔拭子及21日龄鸡胚的样品采集 将采集回的样品进行显色培养，之后进行筛选，挑出可疑菌落，再进行纯培养，备用 对于可疑菌落要进行Rt-PCR的鉴定 经过PCR鉴定过后，确定为沙门氏菌的菌株，再进行血清学实验 对于同一血清型的沙门氏菌做出基因分型实验 沙门氏菌菌落形态 在沙门氏菌的选择培养基上菌落一般呈现紫色，有时是透明的，大概有针尖大小。 四、实验结果 1、沙门氏菌分离鉴定结果 2、沙门氏菌分子分型结果 1、沙门氏菌的分离率与血清型分布 场名 分离菌株数（分离率） 血清型（数量） 3号场 1（2.33%） 肠炎型沙门氏菌（1） 4号场 1（1.59%） II型沙门氏菌（1） 5号场 4（8%） 肠炎型沙门氏菌（2） II型沙门氏菌（1） 不可分型（1） 6号场 4（8%） 肠炎型沙门氏菌（1） II型沙门氏菌（2） 不可分型（1） 7号场 7（14%） 肠炎型沙门氏菌（1） II型沙门氏菌（2） 不可分型（4） 8号场 2（4%） 肠炎型沙门氏菌（1） 不可分型（1） 9号场 22（14.27%） 肠炎型沙门氏菌（5） Tennessee（17） 10号场 108（45%） 肠炎型沙门氏菌（86） Tennessee（10） II型沙门氏菌（9） 不可分型（3） 　一共分离出沙门氏菌共记149株。 肠炎型沙门氏菌较常见共计97株， II型沙门氏菌分离出15株， Tennessee型沙门氏菌分离出27株， 还有10株沙门氏菌是不可分型的。 名称 菌株数 相似度 型别数量 肠炎沙门氏菌 63 8.9%-100% 25 II型沙门氏菌