毕业论文（设计）--动物性食品中磺胺类药物残留elisa方法检测的建立.docVIP

本科毕业论文 动物性食品中磺胺类药物残留ELISA方法检测的建立 Establishment of ELISA Methods and Kits for Rapid detection of Sulfonamides in the food of animals 学 院：兽医学院 专 业：动植物检疫 姓 名：朱晓彤 学 号：121716570 指导教师：郝永清 职 称：教 授 完成日期：二Ο一六年五月 摘 要 磺胺类药物是一类广谱抗菌药，广泛用于预防、治疗细菌性疾病，还常作为饲料添加剂长期在动物饲养过程中使用。大量实验证明长期使用磺胺类药物不仅使人和动物产生耐药性，还会引起人过敏性反应，有致癌、致畸、致突变的作用。磺胺类药物的不合理使用已经严重危害人类健康。因此，研究出一种操作简便、快速、灵敏的磺胺类药物残留检测方法，对于畜产品的安全具有实际意义。酶联免疫吸附法(ELISA)作为一种免疫学检测技术不仅具有上述优点，而且准确性好、特异性强、检测成本低，还可用于大批量样品的检测。本文是对北京维德维康生物技术有限公司兽药残留ELISA检测方法建立及其效果进行评价和讨论。 关键词: 动物性食品 磺胺类药物 残留 检测Abstract Sulfonamides are antibiotics which have wide antimicrobial spectrum. They are used to prevent and cure bacterial infections.SAS are usually added into forage to feed animals. But sulfonamides can cause anaphylactic reaction and carcinogenic mutagenic teratogenic. people. sulfonamide residues for its irrational use can affect people health .Therefore, it is significant to study a method of sulfonamides detection in animal product security. Enzyme linked Immunosorbent assay(ELISA) is a convenient, fast, sensitive method,which has accurate and strong specificity . The method costs lowly and can detect a large number of samples. This article is based upon establishment and effect analysis and discussion of the ELISA for detection of veterinary drug residues by Beijing WDWK Biotechnology Co., Ltd. Key words: Animal food; Sulfonamides; Residue; Detection 目 录 1.引言 1 1.1 磺胺类药物的结构与理化性质 1 1.2 磺胺类药物的毒性 1 1.3 磺胺类药物检测方法 2 1.3.1免疫测定方法 2 1.3.2色谱定量技术 4 1.4本文研究的目的及意义 4 2 材料与方法 5 2.1 实验材料 5 2.1.1药品 5 2.1.2试剂 5 2.1.3 仪器设备 5 2.2磺胺类药物ELISA方法的建立 6 2.2.1竞争性间接一步ELISA方法的选择 6 2.2.2单克隆抗体 6 2.2.3包被抗原稀释度、酶标记物稀释度以及抗体稀释度的确定 6 2.2.4酶标板包被条件的确定 7 2.2.6封闭时间的确定 7 2.2.7酶标记抗体反应时间的确定 7 2.2.8标准曲线的确定 7 2.2.9交叉反应率确定 7 2.2.10最低检测限的确定 8 2.2.11回收率的确定 8 3结果与分析 8 3.1实验结果 8 3.1.1包被抗原稀释度、酶标记物稀释度以及抗体稀释度的确定 8 3.1.2酶标板包被条件的确定 9 3.1.3封闭液及稀释倍数的确定 9 3.1.4封闭时间的确定 10 3.1.5酶标记抗体反应条件的确定 10 3.1.6标准曲线的确定 10 3.1.7交叉反应率的确