第七章柠檬酸发酵机制要点.ppt

温故知新 1、糖酵解与巴斯德效应的三个关键酶均是 、 和 。 2、葡萄糖经EMP途径生成 ，在厌氧条件下，在酵母菌作用下继续生成 ，在乳酸菌作用下继续生成 。 第七章 柠檬酸发酵机制 第一节 柠檬酸生物合成途径 第二节 柠檬酸代谢调节机制 黑曲霉中存在TCA的酶系 第一节 柠檬酸生物合成途径 黑曲霉中80%的葡萄糖分解代谢走EMP途径 黑曲霉能够利用糖类、乙醇和醋酸等发酵生成柠檬酸 柠檬酸是由草酰乙酸和醋酸合成的 黑曲霉中存在EMP途径的所有酶 研究历程 葡萄糖经过EMP途径生成丙酮酸，一方面丙酮酸氧化脱羧生成乙酰-COA；另一方面丙酮酸羧化作用生成草酰乙酸，草酰乙酸与乙酰-COA缩合生成柠檬酸。 复习EMP途径与TCA循环，画出柠檬酸生物合成途径图。 第一节 柠檬酸生物合成途径 草酰乙酸 ← 丙酮酸 → 乙酰-CoA 顺乌头酸 柠檬酸 苹果酸 ↑ ↓ ↓ ↑ 延胡索酸 ↓ 异柠檬酸 α-酮戊二酸 ← ← 琥珀酸 ↑ 葡萄糖 → 6-磷酸葡萄糖 → 6-磷酸果糖 1，6-二磷酸果糖 → 3-磷酸甘油醛 ← 磷酸二羟丙酮 磷酸烯醇式丙酮酸 ↓ EMP途径 TCA循环 草酰乙酸 ← 丙酮酸 → 乙酰-CoA 顺乌头酸 柠檬酸 苹果酸 ↑ ↓ ↓ ↑ 延胡索酸 ↓ 异柠檬酸 α-酮戊二酸 ← ← 琥珀酸 ↑ 葡萄糖 → 6-磷酸葡萄糖 → 6-磷酸果糖 1，6-二磷酸果糖 → 3-磷酸甘油醛 ← 磷酸二羟丙酮 磷酸烯醇式丙酮酸 ↓ 已糖激酶 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶 丙酮酸羧化酶 柠檬酸合成酶 顺乌头酸水合酶 异柠檬酸脱氢酶 → → → → → → → → α-酮戊二酸脱氢酶 关键酶 自主学习并讨论以下问题（P63-69)： 柠檬酸和ATP抑制磷酸果糖激酶，柠檬酸过量积累与EMP途径的畅通存在尖锐的矛盾，这个矛盾如何解决？ 柠檬酸要过量积累，三羧酸循环的大部分必然被阻断，那么草酰乙酸从何而来？ 黑曲霉生产柠檬酸，有那些特有的优势？ 柠檬酸为什么能过量积累？ 第三节 柠檬酸代谢调节机制 锰离子缺乏抑制蛋白质合成，导致细胞内NH4+浓度升高，解除了柠檬酸对磷酸果糖激酶的抑制。 有氧时黑曲霉走不产ATP的侧系呼吸链，解除了ATP对磷酸果糖激酶的抑制。 柠檬酸过量积累与EMP途径畅通的矛盾如何解决？ 丙酮酸羧化酶 PYR（丙酮酸）+CO2→→→→→→→草酰乙酸+ADP+Pi（Keq=0.818） 磷酸烯醇丙酮酸羧激酶 PEP （磷酸烯醇丙酮酸）+CO2→→→→草酰乙酸+ADP+ATP（Keq=0.049） 其中以第一个反应为主，为什么 草酰乙酸从何而来？ 黑曲霉生产柠檬酸的优势 柠檬酸为什么能过量积累 锰离子缺乏，抑制蛋白质合成，导致NH4+浓度升高，有氧时黑曲霉走不产ATP的侧系呼吸链，解除了对磷酸果糖激酶的抑制，促进EMP途径畅通。 丙酮酸羧化酶不被调节控制，源源不断提供草酰乙酸。 丙酮酸氧化脱羧生成乙酰-CoA和两个CO2固定反应的平衡，及柠檬酸合成酶不被调节，增强了合成柠檬酸的能力。 顺乌头酸水合酶催化建立柠檬酸：顺乌头酸：异柠檬酸=90：3：7的平衡，造成柠檬酸最初的积累。 柠檬酸的积累使pH值下降，抑制了异柠檬酸脱氢酶和顺乌头酸水合酶的活力，促进了自身进一步积累。 调节措施（总结） 1、菌种 选育优良菌株 2、发酵条件 锰离子缺乏 有氧 控制Fe2+含量 pH值2.0-2.5左右 柠檬酸的生物合成途径图 黑曲霉生产柠檬酸，有那些特有的优势？ 柠檬酸为什么能过量积累？ 柠檬酸生产调节措施？ 课后思考题