第二章3,4节要点.ppt

蛋白质、黄豆饼粉等利用较慢的氮源，可以防止和减弱氮代谢物的阻遏作用，有利于次级代谢产物的合成； 无机氮或简单的有机氮等容易利用的氮作为氮源(胺盐、硝酸盐、某些氨基酸)时，能促进菌体的生长，却不利于次级代谢产物的合成。 （六）氮分解产物的调节作用 谷氨酸和丙氨酸能阻遏参与放线菌素合成的犬尿氨酸甲酰胺酶Ⅱ的形成，抑制放线菌素的合成； 半胱氨酸和甲硫氨酸能阻遏参与链霉素生物合成的甘露糖苷链霉素合成酶的形成，影响链霉素的合成； 铵能阻遏参与B-内酰胺抗生素生物合成的三肽合成酶(ACV)和脱乙酰氧头孢菌素C合成酶的形成，导致它们的合成受到抑制。 利福霉素的合成中，发现硝酸盐能促进其生物合成，原因：①硝酸盐的存在可以促进糖代谢和三羧酸循环酶系的活力以及琥珀酰CoA转化为甲基丙二酰CoA的酶活力，从而为利福霉素的合成提供更多的前体；②硝酸盐可以抑制脂肪酸合成，使部分合成脂肪酸的前体乙酰CoA转为合成利福霉素脂肪环的前体；③硝酸盐还能促进菌体GS的活力， 使GS浓度降低,同样增加利福霉素前体的浓度。 （六）产生菌生长速率的调节 大多数发酵过程分为生长期和合成期。在生长期次级代谢产物合成酶受到阻遏作用，次级代谢产物不被合成。 青霉素的化学结构式： 青霉素有一个四氢噻唑环 和内酰胺环。R代表 侧链，不同类型的青霉素含有不同类型的侧链。 用不同的菌种或培养条件不同，可以得到各种不同类型的青霉素，或同时产生几种不同类型的青霉素。 青霉素简介： 四氢噻唑环 内酰胺环 侧链 6-APA（6-氨基青霉烷酸） 青霉素的生物合成途径 酰基转移酶 酰化酶 青霉素G 6-APA ACV合成酶 IPN合成酶 青霉素合成的调节方式： 碳分解代谢产物的影响 赖氨酸的反馈调节 氮调控 磷酸盐调控 硫调控 1 碳分解代谢产物的影响 青霉素的生物合成受碳分解代谢产物阻遏，如ACV合成酶，IPN合成酶，酰基转移酶就被阻遏。 葡萄糖可以刺激菌体生长，使作为Lys和青霉素合成中间体的α-氨基己二酸转向合成Lys，抑制青霉素的合成。 α-酮戊二酸+乙酰CoA 高柠檬酸 顺-高乌头酸 高异柠檬酸 α-氨基己二酸 σ-腺苷-α-AAA 赖氨酸 L-α-AAA-L-半胱氨酸 异青霉素N 青霉素G 产黄青霉赖氨酸和青霉素的生物合成途径 高柠檬酸 合成酶 葡萄糖降低青霉素生物合成的速率和得率还由于葡萄糖与6-APA之间形成复合物，从而减少了可用于合成青霉素的中间产物。 葡萄糖有利于菌的生长，但抑制青霉素的合成，而乳糖虽被缓慢利用，却是产生青霉素的最好碳源。 碳源的缓慢利用是大量合成青霉素的关键。 2 赖氨酸的反馈调节 α-氨基己二酸的初级代谢产物是赖氨酸，分枝次级代谢产物是青霉素。 赖氨酸能抑制青霉素的合成，α-氨基己二酸能逆转这种抑制。 赖氨酸能反馈抑制高柠檬酸合成酶，导致α-氨基己二酸合成受阻，因而减少青霉素的合成。 α-酮戊二酸+乙酰CoA 高柠檬酸 顺-高乌头酸 高异柠檬酸 α-氨基己二酸 σ-腺苷-α-AAA 赖氨酸 L-α-AAA-L-半胱氨酸 异青霉素N 青霉素G 产黄青霉赖氨酸和青霉素的生物合成途径 高柠檬酸 合成酶 3 氮调控 产黄青霉生物合成青霉素能高浓度的铵离子抑制，这种抑制与谷胺酰胺合成酶有关： NH4+↗，谷氨酸浓度↗，青霉素↘。 NH4+还能直接阻遏产黄青霉的青霉素合成基因的表达。 如：乳糖培养的产黄青霉菌加入40mmol/L NH4Cl，ACV合成酶和IPN合成酶的基因受到阻遏，这种阻遏通过氮调控蛋白介导，它能结合到启动子区影响其表达。 4 磷酸盐调控 磷酸盐可强化产黄青霉的葡萄糖阻遏，其本身对青霉素的合成没有明显影响。 5. 硫调控 硫酸盐作为前体氨基酸半胱氨酸合成酶原料，在青霉素合成中起着重要作用。 高浓度的硫酸盐阻遏低产产黄青霉菌株的硫酸盐通透酶而影响摄取，在硫酸盐饥饿时，该酶活性及硫酸盐摄取率上升。 高产产黄青霉菌株呈现脱阻遏现象，即使在较高的硫酸盐浓度下仍具有较高的通透酶活性。 万古霉素的生物合成 据研究，天然的万古霉素生物合成共有35步，其先以五种自由的氨基酸单体合成一线形的七肽，然后芳基边链在交联酶的催化下适时地组合、交联，形成复杂的七肽骨架，最后UDP-glucose和UDP-4-epi-vancosamine在糖基转移酶的作用下连接到七肽骨架上。 万古霉素生物合成的五种起始自由氨基酸单体 万古霉素生物合成的逆向合成分析图 在万古霉素家族中发现的糖基 GtfE糖基转移酶识别并将UDP-glucose转移至七肽骨架上 GtfD糖基转移酶识别并将4－epi－vancosamine连接至万古霉素骨架上 小结： 次级代谢产物的基本特征 次级代谢产物的构