第四章噬菌体要点.ppt

噬 菌 体 Bacteriophage 从生物学的角度，自然界中的微生物可分为真核微生物（Eukaryotic microbes）、原核微生物（Prokaryotic microbes）和病毒（Viruses）三类。 我们常说的细菌，属于原核微生物。在微生物界，同样存在类似动植物界的食物链一样的关系。“捕食”细菌的，正是科学家们研究微生物的一种强有力的工具：噬菌体（Bacteriophage）。 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。 大肠杆菌与噬菌体 特 点 个体微小，可通过细菌滤器； 无细胞结构，只有一种类型的核酸，即DNA或RNA； 专性细胞内寄生； 分布广泛； 严格的宿主特异性。 1、形态与结构：三种基本形态，即蝌蚪形、微球形和细杆形。 大多数呈蝌蚪形，由头部和尾部组成。 P22噬菌体 T4噬菌体 phi29噬菌体 第一节 生物学性状 头部 核心：核酸（DNA 或 RNA） 衣壳：蛋白质，六边形立体对称 尾部 蛋白质 尾髓、尾鞘、尾板、尾丝、尾刺 与吸附宿主有关 2、化学组成 ：蛋白质与核酸； 3、核酸类型：DNA或RNA； 4、抗原性：具有抗原性； 5、抵抗力：比一般细菌繁殖体强。 根据噬菌体与宿主细胞间的相互关系分为毒性噬菌体（virluent phage）和温和噬菌体（temperate phage）。 （温和噬菌体） （毒性噬菌体） 第二节 毒性噬菌体 定义：能在宿主菌内以复制的方式增殖，产生许多子代噬菌体，并最终使宿主菌裂解。 在宿主菌内的复制周期包括吸附、穿入、生物合成、成熟与释放等四个阶段。 从噬菌体吸附开始至宿主菌裂解释放出子代噬菌体为止，成为噬菌体的溶菌周期。 吸 附 穿 入 生物合成 成熟、释放 毒性噬菌体的复制过程 噬斑(plaque)：将适量噬菌体和宿主菌液混合接种培养，培养基表面出现透亮的溶菌空斑，每个空斑由一个噬菌体复制增殖并裂解宿主菌后形成。 噬斑形成单位(plaque forming unit, PFU)：单位体积内形成的噬斑数量，即PFU。为了判断活性噬菌体数目的多少，可测量PFU。 定义：噬菌体感染宿主菌后，将其基因组整合到宿主菌染色体中，并随宿主菌的分裂而分配至子代细菌的基因组中。 整合在宿主菌染色体上的噬菌体基因称为前噬菌体(prophage)。 带有前噬菌体的细菌称为溶原性细菌（lysogenic bacterium)。 第三节 温和噬菌体 前噬菌体的形成 溶原性细菌能正常分裂，前噬菌体也可脱离细菌的染色体而进入溶菌周期，产生成熟的子代噬菌体，导致细菌裂解。 温和噬菌体具有的产生成熟子代噬菌体颗粒和裂解宿主菌的潜在能力称为溶原性(lysogeny)。 温和噬菌体有三种存在状态：游离的具有感染性的噬菌体颗粒；宿主菌细胞质内类似质粒形式的噬菌体核酸；前噬菌体。 因此，温和噬菌体有溶原周期和溶菌周期，而毒性噬菌体只有一个溶菌周期。 溶原性转换 (lysogenic conversion) 前噬菌体的基因有时会在溶原性细菌中表达，从而导致宿主菌获得新的性状。 如白喉棒状杆菌，当其带有β-棒状杆菌噬菌体时，就具有产生白喉外毒素的能力，从而获得致病性。 第四节 噬菌体的应用 1、细菌的鉴定和分型 2、检测标本中未知的细菌 3、基因工程的工具 4、细菌性感染的治疗 1915年英国人陶尔德(Twort)在培养葡萄球菌时，发现菌落上出现透明斑。用接种针接触透明斑后，再向另一菌落上接触，不久接触的部分又出现透明斑。1917年在法国巴黎巴斯德研究所工作的加拿大籍微生物学家第赫兰尔(d′Herelle)也观察到痢疾杆菌的新鲜液体培养物能被加入的某种污水的无细菌滤液所溶解，混浊的培养物变清。若将此澄清液再行过滤，并加到另一敏感菌株的新鲜培养物中，结果同样变清。以上现象被称为陶尔德—第赫兰尔(Twort—dHerelle)现象。第赫兰尔将该溶菌因子命名为噬菌体(bacteriophage，phage)。 具有病毒的基本特性。 能耐受低温 不产生子代噬菌体，也不引起细菌裂解，噬菌体DNA随细菌基因组的复制而复制，也称溶原性噬菌体 前噬菌体偶尔可自发地或在某些理化和生物因素的诱导下 1. 细菌的鉴定和分型 : 噬菌体裂解细菌有种的特异性，故可用于细菌的鉴定。如利用已知的噬菌体鉴定未知的霍乱弧菌、鼠疫耶尔森菌等。 2. 检测标本中未知的细菌：凡有细菌的地方都可能有噬菌体，所以从标本中检出某