动物细胞组织.培养.pptVIP

动物细胞工程—动物细胞与组织培养 1、定义: 2、选材： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中让这些细胞生长和增殖。 它们细胞增殖能力强，分裂旺盛， 分化程度低，容易培养。 肿瘤组织或细胞 ＞ 正常组织或细胞 拓展---动物组织或细胞培养的难易程度 分化程度低的组织或细胞 ＞ 分化程度高的组织或细胞 幼体组织或细胞 ＞ 老龄组织或细胞 3、动物细胞培养条件： (1)、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素 定期更换培养液 ） 防止培养过程中污染 防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 (2)、培养基 成分： 种类： 天然培养基：主要取自动物血清，组织提取液，营养价值高，成分复杂 合成培养基：人工配置，成分明确，便于控制试验条件 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 ? ? (3)、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 (4)、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 和植物组织培养基相比有何独特之处？ 液体培养基 、成分中有动物血清等 4.动物细胞生长特性： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 5.过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 5.过程： 动物组织块 细胞悬液 原代培养 传代培养 胰蛋白酶处理 幼龄动物的器官组织；动物胚胎 动物细胞培养 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 1.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 2.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 3.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 胰蛋白酶水解蛋白质 蛋白质 蛋白质和磷脂 能 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 思考讨论 5、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养，使每个细胞与培养液接触 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，因为动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到抑制 4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 6、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 7、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。 这样的过程叫做传代培养 8、如何理解原代培养和传代培养？ 9、传代培养的细胞能一直传代下去吗？ 10、有些为何能一直传下去？ 在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 不都能 发生突变，朝着癌细胞方向发展 11、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞，因为10－50部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织和动物细胞培养的比较 6、动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 1、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ） A．限制性内切酶 B．DNA连接酶 C．胰蛋白酶 D．果胶酶 C 2、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ ） A．动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散 C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D．培养至50代后继续传代的细胞是细胞株 B