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- 2017-01-24 发布于北京
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思考复习题
一、总论部分(毕晟)
1.请结合自己的专业,简单设计一个免疫组织化学标记的方案来研究一个课题.(一抗和二抗的名称和来源、一抗的定位预测;实验方案、生物学意义和临床意义、实验设计(每个对照组的意义)、结果判断。
A.实验一:供传染科医生使用
一抗:鼠抗人MMP-2单克隆抗体(鼠抗人VEGF单克隆抗体、鼠抗人MMP-9单克隆抗体)
二抗:羊抗小鼠Biotin标记抗体
一抗的定位预测:表达在肝组织的细胞浆中
实验方案:选择原发性肝细胞癌组织、肝癌旁组织、正常肝组织三组石蜡标本切片。通过抗体标记MMP-2(VEGF、MMP-9),经过免疫组化染色后判定相关蛋白表达与肝细胞癌的临床病理特征的关系。
生物学意义:VEGF是肿瘤血管生成和侵袭转移过程中的关键因素,可以通过其相关的特异性受体选择性作用于内皮细胞发挥作用(MMPs可以降解基底膜糖蛋白以及细胞外机制的大部分成分,细胞外机制和血管基膜的降解和肿瘤的侵袭转移密切相关)。
临床意义:通过降低VEGF的RNA和其相关蛋白的表达,可能抑制原发性肝细胞癌的生长,降低肿瘤的转移风险(MMP-2、MMP-9被称为明胶酶A、B,其过度表达与肝细胞癌侵袭转移密切相关,可以作为预测肝癌预后的指标)。
实验设计:通过设立癌旁组织和正常肝细胞组织的对照组,对比各组所研究蛋白在不同组织中表达的差异,进而得出实验结论。
结果判断:采用S-P免疫组化染色
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