食品检测中的核酸分子检测技术技巧.ppt

食品检测中的核酸探针 前言 从基因工程技术一开始，就伴随着核酸探针的应用。在许多领域如基因研究、SNP检测、STR检测、肿瘤研究、药理学研究等方面，核酸探针都是一种强有力的工具。为了能更好的应用和发展核酸探针，有必要对核酸探针有一个系统的认识。 核酸探针是以研究和诊断为目的，用来检测特定序列核酸(DNA 或RNA)的DNA或RNA片段，称为核酸探针，作为探针的核酸探针片段可以较短(20 bp)，也可以较(5kb)。 核酸探针具有特定的序列，能够与具有相应核苷酸碱基互补序列的核酸片段结合，因此可用于样品中特定基因片段的检测。 核酸探针的标记物 一.放射性标记 放射性同位素是最早使用、也是目前应用最广泛的探针标记物。常用的同位素有 32P、3 H、35S。其中，以32P应用最普遍。 放射性标记的优点是灵敏度高，可以检测到pg级；缺点是易造成放射性污染，而且同位素半衰期短、不稳定、成本高。因此，放射性标记的探针不能实现商品化。目前，许多实验室都致力于研究非放射性标记的探针。 二.非放射性标记 目前应用较多的非放射性标记物是生物素和地高辛，二者都是半抗原。 生物素是一种小分子水溶性维生素，对亲和素有独特的亲和力，两者能形成稳定复合物，通过连接在亲和素或抗生物素蛋白上的显色物质(如酶、荧光素等)进行检测。 地高辛是一种类固醇半抗原分子，可利用其抗体进行免疫检测，运用原理类似于生物素的