【2017年整理】荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留_蔡其洪.pdf.docVIP

第２４卷 第５期 沈 阳 大 学 学 报 （ 自 然 科 学 版 ） ， ２０１２年 １０月 （ ） 文章编号： （ ） 荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留 蔡其洪１，２，许桂芬１，阮丽琴１，李春来１ （１．莆田学院 医学院，福建 莆田 ３５１１００； ２．食品安全分析与检测教育部重点实验室（福州大学），福建 福州 ３５０１０８） 摘 要：采用 ３＋ 增敏诺氟沙星的荧光强度，建立荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留 优化了 分析实验体系的最佳 值、 ３＋ 质量浓度和反应时间，利用荧光法测定，诺氟沙星的线性方程为 ，线性范围在 · －１ 之间，方法检出限为 · －１，回收率在 、 、 、 ， ９９．３１％之间．该方法简单 快速 灵敏 准确 可用于肉类食品中诺氟沙星含量的测定． 关 键 词：诺氟沙星；荧光分析法；肉类；含量测定 中图分类号：Ｏ ６５７．３ 文献标识码：Ａ 诺氟沙星（Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ，ＮＦＬＸ）又名氟哌酸， 为第三代喹诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌 活性强，毒副作用低和临床疗效高的特点，是临床 应用最广泛的喹诺酮类药物之一．诺氟沙星系化 学合成药物，合成容易，价格低廉，故也是动物和 水产养殖中最重要的抗感染药物之一，然而由于 滥用现象严重，导致药物残留，给食品安全带来严 重的威胁．该类药物的残留除其本身的毒副作用 对人体造成直接危害外，更为严重的是人类长期 食用含较低浓度药物的动物源性食品，容易诱导 人类致病菌产生耐药性，从而影响该类药物的临 床疗效． 目前诺氟沙星的测定方法主要有紫外分光光 度［１－２］，高效液相色谱法［３－５］，荧光分析法［６－８］．由于 荧光法具有灵敏度高、选择性好的特点，是应用最 广泛的方法［９］．其中应用 Ａｌ３＋ 荧光增敏测定诺氟 　 沙星，并用于滴眼液、胶囊［１０］和牛奶［１１］中诺氟沙 星的测定．而荧光分析法用于肉类食品中诺氟沙 星药物残留的检测还未见文献报道，且本文所建 立的 荧 光 法 具 有 更 低 的 检 出 限 （０．０３２ｎｇ· ｍＬ－１），特别适用于痕量药物残留的检测，且样品 前处理方法简单，用于实际肉类样品中诺氟沙星 含量的测定，所得结果令人满意．  １ 实验部分 １．１ 仪器与试剂 Ｆ－４６００荧光分光光度计（日本日立公司）；超 声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；万分之 一电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）；离心 机（上海手术器械厂），ＰＨＳ－３Ｃ酸度计（上海精密 科学仪器公司）． 诺氟 沙 星 （中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所， ），标准溶液质量浓度为 · －１， ３＋ 标准溶液是用 （ ）（国药集团化学试 ， ） · －１， 剂有限公司 分析纯 配成浓度为０．１ｍｏｌ Ｌ 实验所需的各种肉类食品为市场上随意购买，其 他所用试剂均为分析纯，水为纯净水． １．２ 样品前处理方法 取２ｇ经绞碎的各种肉类食品，每次加入１０ ｍＬ ｐＨ＝４的盐酸溶液超声提取三次，每次 １０ ｍｉｎ，各离心 １０ｍｉｎ（３ ０００ｒ／ｍｉｎ），合并三次上清 液，加入１ｍＬ的 Ａｌ３＋ 标准溶液，定容至５０ｍＬ， 　 待测． １．３ 测定方法 于 的具塞刻度试管中配制 ５ｍＬ ＮＦＬＸ－Ａｌ 的最佳体系溶液，使体系溶液中ＣＡｌ３＋ ＝２．０ｍｍｏｌ 收稿日期：２０１２－０６－２９ 基金项目：福建省教育厅科技计划项目（ＪＡ０９１９７）；食品安全分析与检测教育部重点实验室 （福州大学）开放基金 （ＦＳ１０００１）；福建省科技计划重点项目（２０１１Ｙ００４８）． 作者简介：蔡其洪（１９７１－），男，福建莆田人，莆田学院医学院副教授，硕士． ２０ 沈阳大学学报（自然科学版） 第２４卷 ·Ｌ－１、ｐＨ＝４．０，静置５ｍｉｎ，取试液置于１ｃｍ× １ｃｍ石英液池中，设置激发和发射单色仪狭缝宽 度均为５ｎｍ，扫描速度为１ ２００ｎｍ·ｍｉｎ－１，利用 荧光分析法测定． ２ 结果与讨论 ２．１ 金属离子的选择 许多金属离子可与诺氟沙星发生络合反应， 使荧光强度发生变化．实验考察了 Ａｌ３＋ 、Ｆｅ３＋ 、 　 Ｆｅ２＋ 、Ｍ ２＋ 、Ｚｎ２＋ 、Ｃｕ２＋ 和 Ｎｉ２＋ 等七种不同金属 ｇ 　 离子与诺氟沙星配位反应后荧光强度的变化，结 果发现Ａｌ３＋ 、Ｆｅ２＋ 、Ｍ ２＋ 和Ｚｎ２＋ 与诺氟沙星配位 　 ｇ 后荧光强度增强，增强的顺序为 Ａｌ ＞ Ｚｎ ＞ ２＋ ２＋ ；而 ３＋、 ２＋ 和 ２＋ 使诺氟沙星 的荧光强度受到猝灭 因此，我们选择 ３＋增强 诺氟沙星的荧光强度作为分析测定的条件，其荧 光光谱变化如图１． 图１ ０．１ －１ ３＋ · 的荧光激发和发射光谱 Ｆｉｇ．１ Ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｍｉ