南医微生实验课件三.pptVIP

实验内容一、录像：微生物学发展史二、示教：细菌生长现象、细菌变异 消毒灭菌器材三、操作：药物敏感实验、划线分离 细菌的变异 遗传性变异 非遗传性变异 遗传性变异（基因型变异） 非遗传性变异（表型变异） 二、鞭毛变异（H→O变异） 细菌的鞭毛在某些情况下可以消失而变成没有鞭毛的细菌。 有鞭毛的细菌点种在琼脂平板上，由于鞭毛的动力使细菌在平板上弥散生长，称迁徙现象，菌落形似薄膜（德语hauch意为薄膜），故称H菌落。若细菌失去鞭毛，只能在点种处形成不向外扩展的单个菌落，称为O菌落（德语Ohne hauch意为无薄膜） 变形杆菌 0.1%石炭酸 迁徙生长（H） 点状生长、单个菌落（O） 细菌对药物的敏感度以纸片周围抑菌圈直径的大小为标准。抑菌圈愈大 ,说明细菌对该药物愈敏感。 (1) 抑菌圈直径大于 15 毫米为高度敏感。 (2 )抑菌圈直径在 10-15 毫米为中度敏感。(3) 抑菌圈直径在 7-9 毫米为低度敏感。(4) 无抑菌圈为不敏感。 * * 微生物与免疫学试验（三） 细菌生长现象 (1)液体培养基 沉淀生长、混浊生长、表面生长 (2)半固体培养基（0.1%~0.3%琼脂粉） 混浊生长、线状生长 (3)固体培养基（1.4%~2%琼脂粉） 菌落、菌苔 液体培养基 沉淀生长 混浊生长 表面生长 半固体培养基 有鞭毛 细 菌 无鞭毛细菌 线状生长混浊生长 （动力试验） 固体培养基 菌苔 菌落 + - 外界环境 群体 个别细胞 变异幅度 + - 可逆性 - + 遗传 - + 基因改变 非遗传性变异 遗传性变异 一、菌落变异（S→R变异） S型菌落(Smooth)光滑菌落 — 表面光滑有光泽，边缘整齐。 R型菌落 (Rough) 粗糙菌落 — 表面粗糙而暗淡，边缘不整齐。 菌落变异是由于菌体本身起变化。一般光滑的细菌有毒力；粗糙的细菌没有毒力或毒力减退。 smooth clone Rough clone 划线分离注意事项 一、只取一环细菌即可 二、1区划线部分占平板的1/3至 1/2，划线时要连续 三、2区与1区、3区与2区之间 只有最初1～2条线有连接 四、需充分利用平板、注意贴 标签位置、平板摆放 1 2 3 药敏实验 材料： （G＋菌、G-菌）细菌18－24小时斜面培养物，固体培养基平板，抗菌药物干燥滤纸小圆片（青，氯，南，氟），接种环，镊子，95％酒精 方法： 无菌法取斜面培养物上的细菌 接种环在平板内做连续划线，使细菌密布平板表面 用镊子蘸酒精通过火焰三次待冷却后，分别夹取含抗菌药物的纸片，贴在琼脂表面 注意：各纸片间距不小于2cm，距平板边缘不小于0.5－1cm，在平板边缘做好标记 37度温箱培养24小时后，测量抑菌圈直径 药物敏感实验注意事项 一、同组人需分别接种G＋、G—细菌 二、连续划线、细菌密布平板 三、镊子用前、用后必须灭菌并注意防火 四、贴纸片距离、纸片标记（与瓶上标记 吻合）；贴标签位置 青霉素— 为β内酰胺类抗生素。 繁殖 期杀菌，作用机制为抑制敏 感菌细胞壁的形成。 氯霉素— 对G+、G-菌均有抗菌活性。 氟哌酸— 抗菌谱广，对G-菌和部分G+ 菌具有较强的抗菌活性。 氨曲南— 单环类抗生素。作用机制为 抑制菌细胞壁的合成，并抑 制细胞壁水解酶使细胞渗 性发生改变。 结果判断 : *