皂角刺中黄酮提取及抗氧化性研究 答辩ppt课件.ppt

皂角刺中黄酮提取及其抗氧化性研究 一、引言 皂角刺中是一种传统的中药，在临床上有着大量的应用。它含有大量的黄酮，黄酮是一种很强的抗氧化剂，可有效清除体内的氧自由基，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。因此本文将对皂角刺中黄酮的含量进行了测定，并对其氧化性进行研究，以期对皂角刺药理作用的开发提供提供有用的资料。 二、皂角刺概述 皂角刺 （Chinese honeylocust spine ），又称皂角针，为豆科落叶乔木植物皂荚树的棘刺。分布较广。 三、主要仪器 三、主要仪器 四、皂角刺中黄酮测定 皂角刺中黄酮测定数据 五、皂角刺中黄酮抗氧化性研究 1、脂质体系中抗氧化能力测定 2、Fe3+还原能力测定 3、·OH清除能力测定 4、DPPH·清除能力 1、脂质体系中抗氧化能力测定（抑制率） 1、脂质体系中抗氧化能力测定（抑制率） 1、脂质体系中抗氧化能力测定（抑制率） 2、Fe3+还原能力测定 2、Fe3+还原能力测定 3、·OH清除能力测定 3、·OH清除能力测定 4、DPPH·清除能力 DPPH·清除能力 六、结论 根据芦丁标准曲线A=0.0379C+0.0003 稀释倍数为25， 黄酮含量为3.48mg/mL； 算出皂角刺黄酮提取率为8.70%。 六、结论 1）随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力（抑制率）也增加 2）随着皂角刺黄酮浓度的升高样品吸光度逐渐增大，即Fe3+还原能力随着黄酮浓度的增加越来越强； 3）随着黄酮浓度的增加，皂角刺的·OH清除能力越来越弱 4）随着黄酮浓度的增加，皂角刺的DPPH的清除率越来越强。 七、致谢 * * * 二、皂角刺概述 一、引言 三、实验中所用到的仪器 四、皂角刺中黄酮的测定 六、结论 五、皂角刺中黄酮的抗氧化性研究 目录 七、致谢 皂角刺概述 皂角刺化学成分 皂荚皂甙 黄酮 氨基酸 棕榈酸 硬酯酸 油酸 酚类 多元醇 抗菌、抗炎作用 3 1 5 4 2 药理作用 6 降血脂等 治疗乳腺增生等疾病 抗肿瘤作用 免疫调节与抗过敏作用 皂角刺药理作用 抗凝血作用 电 子 天 平 HCR-3018高速离心机 恒温水浴锅 超波清洗器 循环水真空泵 DJZ型粉碎机 芦 丁 标 准 曲 线 绘 制 皂角刺中黄酮测定实验流程 称取2.00g皂角刺（加入20mL60%乙醇） 超声30min 抽滤 定容过夜 离心取上清液 加入药品定容 测定 移取1ml 40℃ 样品 吸光度A 提取率% 提取率平均值% 皂角刺1 0.024 7.83 8.70 皂角刺2 0.024 7.83 皂角刺3 0.032 10.45 实 验 步 骤 1mL LLS+ 1mLFeCl3+1mLVc+1mL样品 混 匀 避光 37℃水浴 1h 加入TCA-TBA-HCl混合液 避光 沸水煮 15min 迅速 冷却 离心取上清液 在532nm处测定吸光度As 以1mL蒸馏水为空白测定吸光度Ac 黄酮浓度 吸光度As 吸光度Ac 抑制率% 142.4 0.367 0.703 47.80 284.8 0.355 49.50 427.2 0.316 55.05 596.6 0.285 59.46 712.0 0.250 66.44 测定数据以及抑制率 抑制率%=(Ac-As/As)×100 以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，抑制率为纵轴作的曲线如下图 随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力（抑制率）也增加。 实 验 步 骤 1mL样品+2.0mL PBS缓冲液 + 2.0mL铁氰化钾 摇匀 50℃水浴 20min 迅速冷却 加入2mLTCA 混匀 3000r/min 离心10min 取2mL上清液+0.4mLFeCl3+2.0mL蒸馏水 以蒸馏水调零 以Vc代替样品作为阳性对照 在700nm测定吸光度 Fe3+还原能力测定表格.doc 以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，样品吸光度为纵轴作的曲线如下图 随着皂角刺黄酮浓度的升高样品吸光度逐渐增大， 即Fe3+还原能力随着黄酮浓度的增加越来越强 实 验 步 骤 硫酸亚铁铵、水杨酸-乙醇溶液 和样品各1mL+0.03mLH202 摇匀 37℃水浴30min 510nm测定吸光度Ax 以蒸馏水代替样品作空白对照测吸光度A0 以Vc作为阳性对照 样品本底吸光度用蒸馏水代替双氧水测定吸光度Ax0 每个浓度平行测定3次 ·OH清除能力测定表格.doc 以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，清除率%为纵轴作的曲线如下图 随着黄酮浓度的增加，皂角刺的·OH清除能力越来越弱。 黄酮浓度（ug/mL） Ae