第二篇基因工程制药新版2.pptVIP

（B） 改造酶切位点 野生型的λ-DNA链上有5个EcoRI位点和7个HindIII位点，不利于重组操作，必须删除至1 - 2个。 为了便于各种来源的DNA片段的克隆，还需要增加一些单一的酶切位点。 （C） 增加选择标记 加装选择标记 lacZ （5）λ噬菌体载体的使用 重组λDNA的构建 (酶切，连接） λ噬菌体的体外包装 λ噬菌体侵染大肠杆菌 重组λDNA的分离 （6）λ噬菌体载体的优点 容量大，装载能力可达23kb，便于构建基因文库 重组子筛选较为方便 DNA提取操作较为简便 4：单链DNA噬菌体M13载体 M13噬菌体（M13 phage）是一种大肠杆菌雄性特异丝状噬菌体，遗传物质是环状单链DNA,全长约6.5kb。宿主是丝状大肠杆菌。它是单链DNA噬菌体中的一个典型的代表。M13感染细菌后，经过复制转变为双链的复制型（RF）。复制型M13可用作克隆载体。 噬菌体M13感染宿主之后，在含有异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的X-gal培养基中生长时，会形成蓝色噬斑。通过蓝色噬斑的出现可以显示噬菌体M13的存在。 感染宿主之后，噬菌体M13所释放的单链DNA可用于制作放射性标记探针，用来检测RNA的结构。 M13噬菌体的组成和结构 M13噬菌体颗粒是丝状的，只感染雄性大肠杆菌。感染宿主后不裂解宿主细胞，而是从感染的细胞中分泌出噬