运载工具——载体(质粒) 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在DNA连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 提取质粒并用限制酶切割 用连接酶将目的基因和质粒连接 重组载体的构建 目的基因与质粒的连接 返回 重组载体的转化和筛选 转化方法: 基因枪法、显微注射法和花粉管通道法。 受体是动物细胞时最常用的是显微注射法,是植物细胞时常用基因枪法。 筛选: 利用载体上的标记基因,借助选择培养基进行筛选。 将目的基因导入受体细胞 有表达产物(导入) 无表达产物(未导入) 选择培养基(载体标记基因) 返回 目的基因的表达和鉴定 基因工程成功的标志: 目的基因表达,进而产生相应的性状。 鉴定: 检测转化的生物有没有显示出目的基因控制的性状。 例:用转基因棉铃饲喂棉铃虫,如虫吃后不出现中毒症状,说明目的基因未表达;如虫吃后中毒死亡,则说明目的基因表达。 返回 课本知识回顾 基因工程又叫做 或 。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种 提取出来,加
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