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1972年,美国斯坦福大学P.Berg等在PNAS上发表了题为∶“Biochemical method for inserting new genetic information into DNA of Simian Virus 40:circular SV40 DNA molecules cotaining lamda phage genes and the galactose operon of Escherichia coli. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69:2904-2909, 1972”,标志着基因工程技术的诞生。 第一个有功能重组体的构建 虽然Berg的工作具有划时代的意义,但是他们并没有证明体外重组的DNA分子具有生物学功能。 1973年,S.N.Cohen等在美国PNAS上发表了题为“Construction of Biologically Functional Bacterial Plasmid In Vitro” (S. N. Cohen, A. C. Y. Chang, H. W. Borer, and R. B. Helling, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 70:3240-3244, 1973) 的论文,宣布体外构建的细菌质粒能够在细胞中进行表达,从而完善了Berg开创的基因重组技术。 Dolly The Sheep 四 基因工程的基本用途 五 基因工程的基本形式 六 基因工程的支撑技术 (三)多利诞生的过程 1.取出第一只成年母羊乳腺的普通细胞,分离基因备用。 2.取出第二只母羊未受精的卵细胞,取出细胞核换上第一只羊乳腺细胞核(“掉包”),放电激活该卵细胞,使之象正常受精卵一样进行细胞分裂,直至一定阶段,胚胎成熟。 3.将成熟的胚胎移植到第三只母羊子宫中发育,妊娠(同正常一样),最后产下多利。 这样一只与第一只羊基因百分之百一样的复制品诞生了。 (四)此克隆非彼克隆 (五)克隆是一把双刃剑 克隆对人类社会伦理道德提出了一场非同寻常的挑战 基因工程药物 转基因植物 转基因动物 基因治疗 基因芯片技术 Bacteria can be engineered to “eat” oil spills. 转基因植物 转基因动物 Human DNA in a Goat Cell This goat contains a human gene that codes for a blood clotting agent. The blood clotting agent can be harvested in the goat’s milk. . Transgenic Goat 第一代基因工程 蛋白多肽基因的高效表达 经典基因工程 第二代基因工程 蛋白编码基因的定向诱变 蛋白质工程 第三代基因工程 代谢信息途径的修饰重构 途径工程 第四代基因工程 基因组或染色体的转移 基因组工程 基因工程 原理方法及应用 蒋爱芹 jianaq@nju.edu.cn 本课程讨论4个问题: 1 什么是基因工程——基因工程的概念 2 为什么能进行基因工程——基因工程的原理和技术 3 怎样进行基因工程——DNA体外重组,重组DNA导入宿主细胞后扩增和表达 4 基因工程的应用和前景——对于医学来说即生产基因工程药物和疫苗、开展基因治疗等 第一章 基因工程的基本概念 D 基因工程的基本用途 C 基因工程的影响与意义 A 基因的概念 B 基因工程的诞生和发展 E 基因工程的支撑技术 1、基因定义的发展 一.基因(gene) 19世纪中 孟德尔 豌豆杂交试验 遗传因子 经典遗传学 20世纪初 摩尔根 果蝇杂交实验 基因连锁互换 基因学 1944年 艾弗瑞 肺炎双球菌转化实验 遗传物质DNA 分子遗传学 1953年 沃森-克瑞克 DNA双螺旋结构 分子生物学 年 G.J.Mendel的豌豆杂交试验 1822-1884 分离定律 自由组合定律 摩尔根(1866—1945) 基因连锁互换规律 1953年,DNA双螺旋模型的诞生 肺炎双球菌转化实验 爱弗莱证实转 化物质是 DNA 2、基因的现代定义 基因从化学上来说,指的是一段DNA或RNA顺序, 该顺序可以产生或影响某种表型(genotype,phenotype),可以由于突变生成等位基因变异体(体细胞父源和母源;正常和突变基因);从遗传学上来说,基因代表一个遗传单位,一个功能单位,一个突变单位。 二、基因工程(genetic engineering) 1、定义 将一
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