临床新项推荐书(加德纳菌生殖).docVIP

临床新项目推荐书 项目名称：免疫荧光染色检测加德纳 临床用途：用于不孕不育领域的加德纳菌病原  项目简介 加德纳菌（GV）是引起细菌性阴道病和尿道炎等生殖道感染的重要病原体，亦与不孕不育高度相关。不孕和不良怀孕史患者中约%-20%左右可检出加德纳菌，不孕配偶间互感率高达90%。加德纳菌已被证实产生唾液酸酶和脯氨酸酶，这些酶能有效分解保护性黏液层的组成部分并且破坏宫颈黏液和其他宿主防御机制并导致相关微生物菌群侵犯上生殖道，引起子宫内膜炎及输卵管炎，如不及时治疗，可因反复感染而引起组织损伤，结果形成输卵管阻塞而导致不孕。 加德纳菌也是男性不育患者生殖道感染的病原菌，是导致少、弱精子症的重要原因之一。加德纳菌感染可累及男性生殖道的不同部位。如睾丸、附睾及其他附属性腺，因而精子在其发育和成熟的不同阶段都可能受到加德纳菌感染的影响而导致精子质量变差，而精子质量精子密度、活动率、活动力差则是导致男性不育或低育的直接原因之一。 上海瑞金医院生殖中心、上海第一妇婴保健院生殖中心、南京市妇幼保健院生殖中心、河南省人民医院生殖中心、北京大学深圳医院遗传医学科、等 临床数据 加德纳菌感染可引起生精细胞大量凋亡、脱落，支持细胞形态改变(刘春萌et al.,2008)。 在生育能力低下的696例患者精液样本中发现加德纳菌是分离最多的一种细菌。与对照比较发现，在加德纳菌感染的样本中精子数量、活动率和形态等情况较为恶化(Francesco et al., 2011)。 无锡市妇幼保健院对1095例男性不育患者进行精液常规检查的同时进行加德纳菌（GV）检测项目，发现在男性不育患者的生殖道内，GV的感染率达33.4％ 。而197例接受治疗的GV阳性不育患者中，经加德纳菌针对性治疗后，少精子症、精子活动率低下、精子活动力低下患者的总有效率分别为93％ 、97％ 、97％，同时发现，治疗后197例患者的精子密度、精子活动率、a级精子所占比例及a、b级精子之和所占比例与治疗前比较差异均有统计学意义(均为P0.01)。由此可见，男性不育患者生殖道加德纳菌感染与精子质量低下有关。 383例男性不育患者精液中检出加德纳菌阳性86例，阳性组精子密度、精子活率、a+b活力、低渗肿率显著低于阴性组；阳性组精子畸形率、精液PH值、白细胞精液症检出率显著高于阴性组。GV感染可通过影响精子密度、活动率、前向运动、低渗肿胀率和精液pH 值、精子畸形率等，使精液综合质量下降，进而导致生育力下降或不育。GV引起的生殖道感染也可导致AsAb阳性率的增高。该研究精液GV感染可影响精液质量，是男性不育的重要原因之一(楚雅玲 et al.,2006) 常州市妇幼保健院对妇科就诊的不育妇女开展加德纳菌检测项目统计数据表明，加德纳菌感染率为26%，加德纳菌感染的原发性不孕的风险指数(RR)增加为2.8，加德纳菌感染继发不孕的风险更高，风险系数(RR)达到34。 87.3%（Virecoulon et al.,2005）。。 综上所述，对男性不育患者生殖道加德纳菌感染研究结果让我们对男性生殖道的病原谱有了新认识，为男性不育治疗拓宽了诊断思路，使治疗精子质量低下以及男性泌尿系统生殖道感染变得具有针对性。 药敏实验表明，加德纳菌仅对克林霉素、甲硝锉等少数抗生素敏感，治疗上也明显有别于其他生殖道感染，如淋病（对头孢菌素、大观霉素敏感）、支原体感染（对强力霉素、环丙沙星敏感）、衣原体感染（对红霉素敏感）和念珠菌感染。 加德纳菌检测项目的开展对临床治疗可提供更准确的用药指导，避免抗生素的滥用。 过去阴道加德纳菌的主要检测技术有：革兰染色法和分离培养法。革兰染色找线索细胞，由于线索细胞的识别受显微镜的质量、标本的采集以及操作者的经验等诸多因素影响，主观性强，准确率不高。分离培养法临床操作非常繁琐，阴道加德纳菌对培养环境与培养设备要求较高，分离复杂，耗时长。 采用免疫荧光染色的方法检测诊断阴道加德纳菌病原体，通过异硫氰酸荧光素(FITC)标记的阴道加德纳菌单克隆抗体与阴道加德纳菌表面抗原发生特异性结合，所形成的抗原－抗体－荧光素结合物在荧光显微镜特定波段激发光照射下发出亮绿色荧光，结合形态学观测进行阴道加德纳菌检测。快速，准确，灵敏度高，特异性好可出彩色图文报告。 1、涂片：将样本轻缓涂抹在载玻片上，充分晾干。 2、固定：使用无水乙醇固定，自然晾干。 3、染色：使用移液器汲取免疫荧光试剂，均匀滴加在玻片涂样处，置于37℃温育箱孵育，孵育时间30分钟。 4、洗涤：使用水缓缓冲洗玻片多次，再将玻片自然晾干。 5、观察：使用荧光显微镜在100X物镜下寻找发绿色荧光的短杆状加德纳菌。 彩色图文报告单 技术保障措施 免疫荧光技术已成为微生物学、免疫学、病理