分子生物与临床.pptVIP

病毒性肝炎的基因诊断 基因诊断是指检测感染者体内病毒核酸的有无,或含量多少来进行病原学诊断的一类方法。 病毒性肝炎基因诊断包括病毒基因种类及含量、基因分型、亚型和变异及准种等的诊断。 甲型肝炎和戊型肝炎无慢性化,且有较好的血清学诊断指标,故一般不需进行基因诊断。 HGV和TTV 病毒性肝炎的基因诊断 定性和定量PCR：定性检测主要是用于未知感染者的诊断,确定患者是否感染了肝炎病毒,结果分别报告为阳性或阴性。 定量测定：己知感染者的抗病毒治疗时动态观察疗效,结果报告需以量来表示。如高出定量范围上限，则需对标本稀释后再测,低于定量范围下限时,则报告小于××copies/ml,不能以阴性形式报告。 肝炎病毒 甲型肝炎病毒与戊型肝炎病毒由消化道传播，引起急性肝炎，不转为慢性肝炎或慢性携带者。 乙型与丙型肝炎病毒主要由输血、血制品或注射器污染而传播，除引起急性肝炎外，可致慢性肝炎，并与肝硬化及肝癌相关。 丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒 戊型肝炎病毒（HEV） 庚型肝炎病毒（HGV） TT型肝炎病毒（TTV） SEN型肝炎病毒（HSV） 甲型肝炎病毒（hepatitis A virus，HAV） HAV的生物学性状 属小RNA病毒科，直径27nm，无包膜 呈20面立体对称 外面为一独立外壳，内含一个单链RNA分子  HAV的电镜照片 HAV的结构 HAV的致病性 HAV的免疫性 HAV只存在单一的抗原抗体系统，即HAVAg和抗-HAV 无论显性感染还是隐性感染均能诱生出高效价抗-HAV 抗-HAVIgM阳性是甲肝的确诊依据 IgM型抗体在感染后仅持续存于3-6个月IgG型抗体则可存在多年 HAV的其他生物学特性 培养特性 原代肝细胞或恒河猴胚肾传代株细胞对HAV敏感，生长缓慢，不引起细胞裂解 抵抗力 比肠道病毒更耐热，60℃1h不被灭活，100oC 5分钟可灭活 对乙醚、酸处理（pH 3）均有抵抗力 氯消毒、紫外线照射、福尔马林处理均可破坏其传染性 常见症状 流感样症状 厌食 恶心 黄疸（眼部及皮肤呈黄色） 尿黄 腹痛 乏力 微生物学检查 感染早期可检测血清中的抗－HAV IgM 流行病学调查可检测抗－HAV IgG 对已接种甲肝疫苗者检测中和型抗－HAV抗体 直接检测抗原或用分子生物学方法检测病毒RNA 乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV） 电镜下的HBV Dane 颗粒 HBV的小球形颗粒 HBV的管形颗粒 HBV的抗原组成 表面抗原HBsAg 核心抗原HBcAg e抗原HBeAg 表面抗原HBsAg 存在于三型颗粒中 是HBV感染的主要标志 分亚型（a, d/y, w/r, adr） 产生抗-HBs Pre S1、Pre S2及抗- Pre S1和抗- Pre S2 核心抗原HBcAg 仅存在于Dane颗粒中 不易在血液中检出 可在感染的肝细胞表面存在 刺激机体产生抗HBc（IgG、IgM） 表明病毒在复制 e抗原HBeAg 仅存在于Dane颗粒中 游离存在于血液中 为病毒复制及强传染性的指标 产生抗－HBe，是预后良好的征象 HBV的其它生物学性状 培养 黑猩猩动物模型、鸭动物模型 用分子生物学技术的细胞培养成功 抵抗力 抵抗力强于HAV 对低温干燥紫外线耐受 不被70％乙醇灭活 100℃ 10分钟可灭活 HBV的致病机制 免疫低下：HBsAg无症状携带者 病毒变异：逃逸免疫 细胞介导的免疫损伤：为主 免疫复合物性的免疫损伤：肝外损伤 自身免疫反应的免疫损伤：肝特异性脂蛋白抗原 HBV的传染机制 传染源 主要传染源是患者或无症状HBsAg携带者 传播途径 密切接触 血液及体液 母婴传播 不严格集体预防接种、药物注射 针刺、文身等 乙型肝炎的特点 我国约有40%-60%人群曾受到过HBV的感染 表现急性乙肝的仅占0.1%-1%，亚临床30%-75%，慢性乙肝1%-5%，乙肝病毒携带7%-20%) 急性乙肝如治疗不彻底，10%患者可转为慢性乙肝 乙肝五项及HBV DNA的临床意义 HBsAg、抗HBs HBeAg、抗HBe 抗HBc （HBcAg） HBV DNA 乙型肝炎病毒抗原,特别是表面抗原,在血液中的浓度较高,现症HBV感染——明确诊断。 仅抗HBc单项阳性,也可在血清中检测到 HBV DNA 乙型肝炎的诊断往往不需要进行病毒核酸的检测。 抗病毒治疗时,血清中的病毒核酸含量是反映病毒数量和复制活跃程度最可靠的直接指标、动态观察药物疗效的确切指标,特别是对于HBeAg阴性患者。 预防及免疫 控制传染源，切断传播途径 人工自动免疫： 疫苗（血源性、基因工程) 人工被动免