实验目的-生物学实验教学中心-河南农业大学.pptVIP

实验指导原则p150 成败有其必然,成功不靠运气,失败也非必然 先胜而后求战,而不是先战而后求胜 弄懂原理,可以修改实验 熟读《基因工程原理与实验指导》/ Molecular cloning 通盘考虑, ‘高手下棋看3步’ 写好实验方案 图示法简化操作过程 做好实验记录 基因工程, 思想上大胆创新, 操作上谨小慎微 实验总路线 【实验原理】 实验目的 实验原理 实验器材 实验内容 注意事项 思考题 回收试剂盒在合适缓冲液条件下可吸附DNA，而后在洗脱缓冲液下洗脱下来，从而得到纯化基因。由于PCR扩增中可以产生游离的A-碱基，能够与T-载体上游离的T-碱基互补匹配，在连接酶作用下形成重组DNA。 【实验仪器】 基因回收试剂盒、移液枪、离心机、水浴锅、恒温培养箱 实验目的 实验原理 实验器材 实验内容 注意事项 思考题 【实验步骤】 1．回收目的基因，按照回收DNA试剂盒说明进行目的基因回收 高盐浓度和促溶剂下，琼脂糖之间的氢键断裂而迅速溶解，DNA从胶基质中释放出来并选择性地吸附到QIAEx球状的硅胶颗粒上，由于高浓度的促溶盐如NaI、NaClO4或CuSCN，修饰了水分子的结构，促使溶液内的DNA分子能充分地吸咐到硅胶的表面。然后用高盐缓冲液除去残余琼脂糖。再用含有乙醇的缓冲液洗去盐和染料。最后用TE缓冲液或水将QIAEx球状硅胶颗粒内的DNA洗脱下来。 实验目的 实验原理 实