(绿茶与肾纤维化.doc

[转载]绿茶抗大鼠肾间质纤维化作用的实验研究 已有 549 次阅读 2010-9-23 09:50 |个人分类:未分类|系统分类:论文交流|关键词:绿茶；慢性肾衰竭；大鼠；肾间质纤维化 ? 邱模炎1，姜岳2，孙慧1 （1 中国中医科学院望京医院，北京?100102；2北京市朝阳区太阳宫社区卫生服务中心，北京?100028） ? 摘要：目的观察绿茶抗肾间质纤维化的作用以及对肾间质纤维化大鼠肾脏Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的影响。方法采用“单肾切除加腺嘌呤灌胃法”建立大鼠慢性肾衰竭模型。治疗组予绿茶液灌胃治疗，对照组予尿毒清溶液灌胃治疗。给药4周后处死，肾脏石蜡切片分别进行HE染色、PASM染色、Masson染色、Sirius Red染色、Mallory染色，光镜下观察大鼠肾组织5种染色的病理形态学改变，HE染色进行肾小管间质病变半定量分析，PASM染色、Masson染色、Sirius Red染色进行肾脏组织病理学图像分析。结果绿茶组在肾间质纤维化面积、肾小球系膜积分光密度值、肾间质中I、Ⅲ型胶原分布面积等方面的作用与模型组对比，P0.05。绿茶能够减轻腺嘌呤对大鼠肾脏的病理损害，并具有抗肾间质纤维化的作用。结论绿茶有抑制I、Ⅲ型胶原纤维增生的作用，这可能是绿茶防治肾间质纤维化、延缓慢性肾衰竭发展进程的机制之一。 ? 关键词：绿茶?慢性肾衰竭?大鼠?肾间质纤维化 注：本文转载自：《茶叶科学》，2008，28（5）：353-357. ? 目前对非药物疗法的研究越来越多，非药物疗法以其使用安全而受到广泛关注。在慢性肾衰竭的治疗上，中医非药物疗法被广泛使用。绿茶饮用十分广泛，茶多酚是从绿茶中提取出来的有效成分，是由茶叶中的黄烷醇类、花色素类、花黄素类、缩酸及缩酚酸类组成的化合物，可以防止免疫过强和炎症反应，抑制细胞和机体脂质过氧化，从而能够抑制肾病的发生；同时茶多酚还可抗凝、抗血栓、改善血液流变学，从而可以预防肾病进展，改善慢性肾功能不全的症状。Manabu等研究表明摄入绿茶可改善慢性肾衰竭的症状[1]。但目前尚无绿茶防治慢性肾衰竭的实验研究，有必要开展绿茶防治慢性肾衰竭的实验研究。 1 实验材料 1.1 实验动物 Wistar雄性健康大鼠 65只，6周龄，清洁级，体重200±20g，由中国医学科学院实验动物研究所提供（合格证号：SCXR京：2005－0013）。 1.2 实验药物 1.2.1造模药物：腺嘌呤，购自北京化学试剂公司，用前将其加入蒸馏水中配制成20mg/ml的混悬液。 1.2.2治疗药物：绿茶为信阳毛尖，河南省信阳市云雾赛山茶厂2006年出品。根据文献[2]的方法，取正常人60kg体重用药剂量的7倍为大鼠剂量，人用剂量为10g/60kg，则每100g大鼠每日剂量为：0.17g。用90℃初开沸水冲泡茶叶3～5分钟，泡好冷却过滤，再浓缩制成含生药量为0.12g/ml的浓缩液。盛于消毒干净磨口玻璃瓶中，密封储存于4℃冰箱内备用。 1.2.3阳性对照药物：尿毒清颗粒由广州康臣药业有限公司生产，批号根据文献[3]，大鼠使用尿毒清的剂量为3.75g/kg。将尿毒清颗粒以蒸馏水配制成含药量为375mg/ml的溶液。 2实验方法 2.1 模型制作方法：采用“单肾切除加腺嘌呤灌胃法”建立大鼠慢性肾衰竭模型[4]。大鼠行左肾切除术1周后，每天以200mg·kg－1·d－1剂量的腺嘌呤混悬液灌胃造模，连续28天。 2.2 随机分组方法：55只大鼠根据体重按随机数字表法随机抽取10只作为正常组，10只作为假手术组，35只行左肾全切术。术中及术后1周死亡大鼠5只，术后1周，将存活的30只大鼠根据体重按随机数字表法随机分为模型组、绿茶组、尿毒清组各10只。 2.3 给药方法：正常组、假手术组、模型组：于分组当天开始每天灌胃2ml蒸馏水，直至第28天。治疗各组于术后分组当天开始，每天灌胃直至第28天。尿毒清组按3.75g·kg－1·d－1的剂量给尿毒清溶液，绿茶组按1.7g·kg－1·d－1的剂量给绿茶液。 2.4 观察指标 2.4.1病理染色方法：肾脏石蜡切片，分别进行苏木素伊红（HE）染色、六胺银（PASM）染色、马松（Masson）染色、天狼星红（Sirius Red）染色、Mallory染色，光镜下观察大鼠肾组织5种染色的病理形态学改变。 2.4.2肾小管间质病变半定量分析方法：根据Sergio的半定量分级标准，随机选取HE染色每组镜下的20个视野，进行半定量分析。 2.4.3肾脏组织病理学图像分析方法：在每组PASM染色切片包含肾小球的区域，随机选取200倍光镜下10个视野，用MetaMorph 图像分析系统对所选取视野中PASM染色肾小球系膜阳性目标光密度值进行测定。每组Masson染色切片在光镜200倍视野下分别观察10个