【2017年整理】遗传实验培训讲义.docVIP

PAGE PAGE 9 蝗虫精细胞减数分裂观察 实验目的： 通过对雄蝗虫精原细胞减数分裂装片的观察，初步学会识别减数分裂某些阶段染色体的形态和数量等的变化，加深对减数分裂过程的理解。 实验原理： 减数分裂是有丝分裂的一种特殊方式。减数分裂（Meiosis）的特点是DNA复制一次，而细胞连续分裂两次，形成单倍体的精子和卵子，通过受精作用又恢复二倍体，减数分裂过程中同源染色体间发生交换，使配子的遗传多样化，增加了后代的适应性，因此减数分裂不仅是保证生物种染色体数目稳定的机制，同且也是物种适应环境变化不断进化的机制。 减数分裂由紧密连接的两次分裂构成。通常减数分裂I分离的是同源染色体，所以称为异型分裂（heterotypic division）或减数分裂（reductional division）。减数分裂II分离的是姐妹染色体，类似于有丝分裂，所以称为同型分裂（homotypic division）或均等分裂（equational division）。和有丝分裂一样为了描述方便将减数分裂分为几个期和亚期。 一 减数第一次分裂――减数分裂期I 1 前期I 前期I持续时间最长，达几周，几个月甚至几十年，它的变化最复杂，可呈现出不同形态特征。 1)细线期(凝集期)?①染色质凝集；②染色体呈单条细线，细线两端与核膜相联；③染色体纤维上出现染色粒。 2)偶线期(配对期)? 同源染色体配对，即1条来自父方1条来自母方的一对同源染色体相互靠近，结合在一起。 3)粗线期(重组期)?①染色体明显变粗变短，紧密结合；②同源染色体间发生DNA片段的交换和重组；③合成DNA及组蛋白，有些DNA减数分裂期专有的组蛋白在粗线期合成。 4)双线期(合成期)?①同源染色体分离但留交叉；②染色体部分去凝集，RNA转录活跃；③核仁明显变大。 5)终变期(再凝集期)?①染色体重新凝集呈短棒状，此时观察染色体最容易；②核仁消失；③染色体四分体端部交叉结合在一起；④姐妹染色单体借着丝粒相连。 随后核膜破裂，标志着中期I的开始。 细线期 偶线期 粗线期 双线期 终变期 2 中期I?①核膜破裂，纺锤体形成，②染色体四分体排到在赤道板上，排列后开始分离。 3 后期I?同源染色体对相互分离，移向两极。 4 末期I及间期?时间短，间期没有DNA复制。末期I及间期细胞的变化有两种类型:①没有可见的染色体去凝集，立即准备二次分裂。②染色体去凝集形成染色质，核膜出现，胞质分裂，形成两个间期的子细胞，经短暂间隔后，细胞开始进行减数分裂第二次。 中期I 后期I 二 减数第二次分裂――减数分裂期Ⅱ 减数第二次分裂过程与有丝分裂基本相同，分为前，中，后，未各时期。这次分裂实际上是一次有丝分裂。其过程简单，二条姐妹染色体分开，变成单倍染色体。 前期II 中期II 后期II 末期II 实验材料及用品： 蝗虫，载玻片，盖玻片，剪刀，镊子，解剖针，表面皿，显微镜。 醋酸胭脂红染液 实验步骤： 取活雄性蝗虫1头，剪去翅和足，从蝗虫腹部剖开，靠近胸节处有桔黄色团状结构，为精巢。用蒸馏水冲洗可见每条精细小管的一端连于输精管，另一端为分散的盲端。取一个或两个精细小管放于载玻片上，用刀片在精细小管上横切两到三次。以醋酸胭脂红染液染色10－15分钟，同时以小镊子轻轻挤压精细小管外壁，以使性母细胞或减数分裂中各时期的细胞流出精细小管管壁，以利于观察，压片后进行观察，可以见到减数分裂的各个时期。 附：减数分裂与有丝分裂的比较 减数分裂与有丝分裂的共同点都是通过纺锤体同染色体的相互作用进行细胞的分裂。但二者之间有许多差异∶ ①有丝分裂是体细胞的分裂方式，减数分裂主要是细胞产生配子的过程(生殖细胞也有有丝分裂)。 ②有丝分裂是一次细胞周期, DNA复制一次, 分裂一次, 染色体由2n→2n;减数分裂是两次细胞周期, DNA复制一次, 细胞分裂两次, 染色体由2n→1n。 ③有丝分裂中, 每个染色体是独立活动;在减数分裂中, 染色体要配对、联会、交换和交叉。 ④有丝分裂之前, 经DNA合成, 进入G2期后才进行有丝分裂; 减数分裂之前, DNA合成时间很长(99.7%合成, 0.3