水曲柳中荷包花苷A的分离及测定..docxVIP

科 研 训 练 报 告水曲柳中荷包花苷A的分离及检测学 生 姓 名专 业学 号指 导 教 师学 院 目的及要求：目的：通过科研训练，使学生能够在指导教师的指导下选定课题，完成实验，并写出具有一定质量的总结报告、学术论文或申请专利等；学生在毕业时将具有一定创新意识和创新能力、有一定参与实验和实践的能力以及分析问题和解决问题的能力，为今后独立开展科学研究工作奠定基础。要求：了解本专业的科研方法，受到较严格的科学思维训练。了解本学科某一方向发展的历史概况以及当代的某些新发展和应用前景。有较强的语言表达能力，掌握资料查询、文献检索以及运用现代信息技术获取相关信息的基本方法。能够对某一课题，进行文献检索，收集资料，完成文献综述。了解科学论文、学士论文、硕士论文的国家标准定义，掌握学士论文的基本内容与要求。掌握科学论文的写作规范和写作的基本方法，具有一定的科学研究能力。主要内容：1、查阅文献，对水曲柳中的总苯乙醇苷类成分进行提取，可以采用有机溶剂提取法，摸索最佳的提取的溶剂种类、比例和提取时间；2、熟悉色谱分离方法的基本操作，熟悉旋转蒸发仪的使用，熟悉超声波在中药有效成分提取中的使用；根据已知化合物的物理化学性质，选择分离目标化合荷包花苷A的有效介质；3、设计对分离的荷包花苷A进行快速检测的方法，并对实验报告进行分析。成绩： 指导教师评语：水曲柳中荷包花苷A的分离及测定摘要:目的从水曲柳中分离出较纯的荷包花苷A。方法采用大孔树脂吸附及硅胶柱层析提高对提取物的分离程度，采用薄层色谱法与标准样品比对进行检测。结果采用D101大孔树脂（?6cm，35cm高）吸附柱，使用乙醇为洗脱液，初步获得含有荷包花苷A的混合提取物，再通过硅胶柱（?4cm，24cm高）层析柱，使用乙酸乙酯、甲醇和甲酸为流动相，分离出较纯的荷包花苷A。结论大孔树脂吸附及硅胶柱层析提取条件工艺简单，成本低，节约能源，可增加水曲柳的利用率。关键词:水曲柳；大孔树脂；荷包花苷A；薄层色谱；硅胶柱层析第一章 引言水曲柳（Fraxinusm andschurica Rupr.）是一种落叶乔木，高度可达30m，直径超过1 m，主要分布于我国大兴安岭东部和小兴安岭等地。水曲柳为优质木材，但水曲柳皮却没有被充分开发利用，只在民间作为抗风湿的偏方使用，其化学成分国外有见报道，国内很少有人研究，其药效价值还有待开发[1]。荷包花苷A（calceolarioside A）属于苯乙醇苷类化合物，已发现的苯乙醇苷类化合物在自然界的分布相当广泛，几乎分布在各个科属中，在较进化的双子叶植物纲合瓣花亚纲中，特别集中于玄参目和唇形目中，如：玄参科、木犀科、唇形科、马钱科等，而水曲柳正是木犀科植物。由于这类化合物分布广，药理作用强,目前对此类化合物的研究也逐渐成为学者们的研究重点[2]。采用大孔树脂进行天然化合物的分离纯化，常用于分离纯化苷类化合物，同传统方法如溶剂萃取法相比，溶剂用量大为减少，在操作全过程中一般只使用水与乙醇作为溶剂，具有无残留，无污染等特点。D101大孔树脂树脂属于非极性，可用于吸附皂苷类及某些生物碱类化合物，本实验主要用于除去样品中的不需要的糖。硅胶层析的主要特点是能通过对混合物质中的不同成分吸附保留时间的差异，达到分离提纯的目的。其原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。可用于脱除芳烃物质或中草药有效成分的分离提纯，高纯度物质的制备等[3]。1.1 水曲柳水曲柳属木犀科、梣属植物，渐危种，是古老的残遗植物，分布区虽较广，但多为零星散生，是国家Ⅱ级重点保护野生植物。因砍伐过度，数量日趋减少，目前大树已不多见。实验材料为木樨科植物水曲柳的树皮，功效包括清热燥湿，清肝明目，活血调经。主要用于痢疾、牛皮癣、月经不调、白带等疾病。成分主要含有马粟树皮甙和微量的马粟树皮素；也含有虫白蜡，虫白蜡含酯类、游离酸、游离醇、烃类和树脂等。1.2 大孔树脂吸附法大孔树脂吸附分离技术是以采用特殊的吸附剂，从中药材提取液中有选择地吸附其中的有效成分，除去无效成分的一种提取精制的新工艺。此外，大孔吸附树脂还可应用于中药有效成分样品组成含量测定前的预分离。该方法具有设备简单、操作方便、节省能源、成本低、产品纯度高、不吸潮等优点，因此大孔树脂吸附法在中药研究和生产中的应用日益广泛。将这种方法应用于中药有效成分的分离取得了相当显著的成果。近年来，大孔吸附树脂法已广泛地应用于中药有效成分的分离与精制。目前，该技术已在国内广泛用于纯化苷类、黄酮类、生物碱类成分。随着有关基础研究的进一步深入，以及相关标准、法规的进一步完善，大孔树脂精制纯化技术必将成为推动中药现代化的重要手段