多孔动物细胞培养板 * 动物细胞融合和单克隆抗体 学习目标 了解细胞融合的原理、过程和意义 理解单克隆抗体制备的过程和应用 重点难点 1.学习重点: 单克隆抗体的制备和应用 2.学习难点: 单克隆抗体的制备过程 温故而知新——植物细胞杂交(马铃薯番茄) 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 植物细胞的融合 杂种细胞AB 杂种植株 脱分化 愈伤组织 再分化 植物组织培养 原生质体B 原生质体A 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 植物细胞A 植物细胞B 三、动物细胞融合 1.概念: 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的单核细胞,称为杂交细胞。 2、基本原理: 细胞膜的流动性 (植物原生质体融合) 物理法: 化学法: 生物法: 灭活的病毒 电激、振动、离心 聚乙二醇(PEG) 例如:仙台病毒 3、诱导方式 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂种细胞 (细胞膜具有一定的流动性) 生物法: 灭活的病毒 (丧失感染性、保留抗原结构) 4.过程: 比较 项目 原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物 体细 胞杂 交 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、 电激、 振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和,获得 杂种植株 动物 细胞 融合 用
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