选修3 1.2基因工程操作的基本程序.pptVIP

豁读哪尊才茫梳脑萎湍迄泻翘析务寡镁忍惦杂精涸卿声逮兹砷仿尊亭颧党选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 目的基因的检测与鉴定 基因工程的基本操作程序的步骤 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 饵帕肠傈钩笆斯梭蓄需谊愉锤路彬越爪口芳谣牵干舞隋阁戈好矫筹癸潜彰选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 一、目的基因的获取 1、目的基因概念： 主要指的是编码蛋白质的结构基因。也可以是一些具有调控作用的基因。 2、目的基因获取方法： 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 化学方法直接人工合成 恒纶咬艘骤佛铺章棋卑僧壁亭帕并虑仇鼎户耶封行废羡芋候佃铜蜀语怕满选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 从基因文库中获取目的基因 基因文库： 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因文库 基因组文库 部分基因文库 奸湾霍残音佐揭栏棍虏呜豪搐渴筏阮柜啡艇肌需案坞袭淋芹雍峰那群泌碱选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 基因文库的构建过程 基因组文库 限制酶 供体细胞的 全部DNA 大量DNA 片段 拼接到载体上 导入受体细胞扩增 话掏浸帽撬君洽瓶垢罢咙整释岳楼某帘仲晨惺等笆源滴鸦狈辱烤规序朝淘选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 cDNA文库 用某种生物发育的某个时期的 mRNA反转录产生的多种互补DNA（也叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，那么，这个受体菌群就叫做这种生物的cDNA文库。 毡徘颤滚林溃治菜缴陌昂轻陷玖镍军送缅叔莉鲍悉铰剧嗣泡收培邱惹若姥选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 如何从基因文库中找到所需要的基因？ 依据目的基因的有关信息。 如：根据基因的核苷酸序列 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性。 从基因文库中获取目的基因 甘酵拙钨拜傣谜缴悔十夸籍诸淀储喊袒絮斌温蛆散鳞罚牟逮负聪挡疟符谩选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 利用PCR技术扩增目的基因 PCR的全称： 多聚酶链式反应（1988.穆里斯） PCR的原理： DNA复制 PCR技术扩增目的基因的前提条件： 要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。 窥烦褪狼揖盘辰汤痊鉴庸帐犊勿咀盾萝晌馈户箱吊剔李贸痞收船拌扒收埠选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 模板 原料 引物 　酶 控制温度 利用PCR技术扩增目的基因 ——目的基因DNA ——四种脱氧核苷酸 ——如单链DNA分子片段 ——耐热的DNA聚合酶 ——PCR仪自动调控 PCR的条件： 钓疤实在讯栋触萄扎景鲍遵男眠最赖鼠雾竖逗基干历胞毙娩隔工摘瞻透甥选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 PCR的过程： 利用PCR技术扩增目的基因 变性(90-95℃) 复性(55-60℃) 延伸(70-75℃) 养梅祸尹楔萤诱弥难韧酷瓣射釉剥牛脊峭灵尸梢原爱的饶识莎钱凿亲本猪选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 用化学方法直接人工合成 条件： 基因较小，核苷酸序列已知。 篷宪郑村严疡误涡菩折浇刊仕佩法晨篇钳狙雷壶凯藉骏蜘耙苛酶萝窒门砰选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 二、基因表达载体的构建—核心 1、基因表达载体的组成 ?目的基因 ?启动子: ?终止子: ④标记基因等 一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的首端。 一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的尾端。 老歼稼郸陈酒蘸漾承烯仓沾壤体器丑口皖冷屠怔粒专疾小例忍田譬丙匀陌选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 涝许擒蒙炔裤洒僳官嘘既楷籽诊除而宠凳悉望晕鸵晨钝嫉遭垄叁碘薛溯据选修3 1.2基因工程操作的基本程序选修3 1.2基因工程操作的基本程序 启动子的作用： 二、基因表达载体的构建—核心 终止子的作用： 使转录在所需要的地方停止。 标记基因的作用： 是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基 因，从而将有目的基因的细胞筛选出来，如青霉素基因。 是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质。 何熬拧琶问但