常用血细胞化学染色原理及应用..docVIP

常用血细胞化学染色原理及应用（1）过氧化物酶染色的原理和临床意义[原理]? 粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶能将底物过氧化氢分解，产生新生态氧，它将四甲基联苯胺氧化为蓝联苯胺。（2）过碘酸-雪夫染色的原理和临床意义[原理]? 过碘酸-雪夫又称糖原染色。胞浆内存在的糖原或多糖类物质（如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等）中的乙二醇基经过碘酸氧化，转变为二醛基，与雪夫试剂中的无色品红结合，形成紫红色化合物而沉积于胞浆中糖原类物质所存在的部位。该反应称为过碘酸-雪夫（PAS）阳性反应  [临床意义] 1）急性白血病类型的鉴别? 红白血病的幼红细胞PAS染色多呈阳性反应，阳性率高，反应强；成熟红细胞有时亦可为阳性；急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应；急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应；急性早幼粒细胞白血病　异常早幼粒细胞的PAS染色为阳性反应；急性单核细胞白血病原、幼单核细胞PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒，巨核细胞白血病原巨核细胞PAS染色呈阳性或强阳性反应，表现为红色颗粒或块状。 2）各类贫血的鉴别? MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（曾称地中海贫血）的幼红细胞PAS染色多为阴性反应，有时可出现阳性反应；巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。 3）其他细胞类型的鉴别? 戈谢细胞呈强阳性反应；尼曼－匹克细胞PAS染色为弱阳性，空泡中心阴性。非霍奇金淋巴细胞PAS染色呈阳性反应；R-S细胞则为弱阳性或阴性反应。骨髓内转移的腺癌细胞PAS染色呈强阳性反应，表现为红色颗粒或块状。 （3）中性粒细胞碱性磷酸酶染色的原理和临床意义（偶氮耦联法） [原理]? 中性粒细胞内碱性磷酸酶在pH9.-9.6时，能水解磷酸萘酚钠，释放出磷酸与萘酚，再以重氮盐与萘酚耦联成不溶性有色沉淀于胞质内酶所存在的部位。 正常血细胞的染色反应： 碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞，除巨噬细胞可呈阳性反应外，其他细胞均呈阴性反应。 成熟中性粒细胞碱性磷酸酶积分的计算100（包括分叶核和杆状核粒细胞），参考值为7-51 。 [临床意义]（4）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色的原理和临床意义NAS-DCE [原理]? 细胞内的氯乙酸AS－D萘酚酯酶（NAS-DCE）水解基质液中的氯乙酸AS－D萘酚，产生AS－D萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质内酶所存在的部位。  正常细胞反应 : 1. 粒细胞系---中性粒细胞(除原粒细胞外)均可呈阳性或强阳性,且酶活性并不随细胞成熟而增强，定位于胞浆内。嗜酸粒细胞为阴性和弱阳性，嗜碱为阳性。 2. 单核为阴性，个别阳性。淋巴细胞系、浆细胞系、幼红细胞系、血小板均呈阴性。 [临床意义]?临床上主要用于急性白血病类型的鉴别 急性粒细胞白血病白血病原粒细胞；急性单核细胞白血病急性淋巴细胞白血病白血病细胞；（5）α-醋酸萘酚酯酶染色的原理和临床意义（α-NAE） [原理]? α-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）水解基质液中的α-醋酸萘酚，释放出α-萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。—原单为阴性或弱阳性，单核和幼稚单核为阳性, 被NaF抑制。 3.巨核细胞系--巨核细胞和血小板为阳性。 4.其他红细胞系-----幼红和淋巴一般为阴性，少数可可呈弱阳性，不被NaF抑制，浆细胞阴性。 [临床意义]? 主要用于急性白血病类型的鉴别。氟化钠抑制（6）碱性α-丁酸萘酚酯酶染色的原理和临床意义α-NBE [原理]? 细胞内的α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）在pH碱性条件下水解基质液中的α-丁酸萘酚，释放出α-萘酚，后者与基质液中的重氮盐耦联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质内酶所存在的部位。本试验常用的重氮盐为坚牢紫酱GBC，形成的有色沉淀为红色。α-NBE主要存在于单核细胞中，其阳性产物能被氟化钠抑制，而其他细胞系列的阳性产物不能被氟化钠抑制。 正常细胞阳性反应: 1.粒细胞系----各期粒细胞均阴性。 2.单核细胞系—分化差的原单阴性，分化好的原单阳性，幼稚及成熟单核细胞呈阳性，被NaF抑制。 3.淋巴细胞----T、非T非B淋巴细胞可呈阳性，B淋巴细胞阴性。 4.其他细胞——幼红细胞、巨核细胞系、浆细胞均呈阴性或弱阳性。组织细胞可以呈阳性，但不被NaF抑制。 [临床意义]?α-NAE临床意义相同，敏感性不如α-NAE，而特异性较差，是急性白血病常用的化学染色。 （7）酸性磷酸酶染色的原理和临床意义 [原理]? 细胞内的酸性磷酸酶在酸性条件下，将基质中的磷酸萘酚AS－BI水解，释出萘酚AS－BI，再与重氮盐耦联，形成不溶性有色沉淀，定位于胞浆中。 [临床意义] 1）白血病类型鉴别?