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1.1 DNA重组技术的基本工具 教材分析 高中生物选修3第一章《基因工程》,是选修3整本书的重点,它是其它几个章节的基础。 本节是专题一《基因工程》的第一节,内容较抽象,不易理解,但这节的学习是下一节《基因工程的基本操作程序》的基础,在整体上起到举足轻重的作用,是本章的重点内容。 重点 难点 教学重点: DNA重组技术所需要3种基本工具的作用 教学难点 基因工程载体需要具备的条件 目标分析 知识目标: 简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用 能力目标: 培养学生自己动手制作模型的能力 情感目标: 认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新 教法、学法分析?: 基因工程的概念: 资料分析: 此转基因实验实现了哪种生物的哪些性状在另外哪种生物中表达? 性状的表达与我们从前学过的什么过程有关? 要实现药物基因在烟草中的表达,要提前做哪些关键工作? 学习目标 1 简述DNA重组技术所需三种基本工 具的作用 2 培养学生自己动手制作模型的能力 3 认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新 DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) ——限制性核酸内切酶 DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) ——DNA连接酶 基因转移工具(“分子运输车”) ——基因进入受体细胞的载体 思考 分组讨论 原核生物为什么没有在长期的进化过程中由于外源DNA的入侵而灭绝,有什么保护机制? 限制性内切酶 黏性末端和平末端 限制酶所识别的序列有什么特点 限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 DNA连接酶——“分子缝合针” 连接酶有两种: E·coli连接酶:从大肠杆菌中分离得到。 T4连接酶:从T4噬菌体中分离得到。 这两种连接酶催化反应基本相同,都是连接双链DNA的缺口,而不能连接单链DNA。 E·coli连接酶只能连接黏性末端; T4连接酶既可“缝合”黏性末端,又可“缝合”平末端。 DNA连接酶——“分子缝合针” DNA连接酶与DNA聚合酶一样吗?为什么? 阅读 总结 限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,也有两种酶。 3.基因进入受体细胞的载体 质粒 载体必须具备的条件 如果载体对受体细胞有害将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,没有标记基因我们能否鉴定? 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样? 作为载体没有切割位点将怎样? 作为载体的必要条件 1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存; 2、具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接; 3、具有某些标记基因,便于进行筛选。(如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等 ) 4、对受体细胞无害 达标练习 在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( ) 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 基因工程常用的受体细胞有( ) (1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌 (3)支原体 (4)动植物细胞 A. (3)(4) B. (1)(2)(4) C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3) A、 BamHI和EcoRI;末端互补序列—AATT— B、 BamHI和HindⅢ;末端互补序列—GATC— C、 EcoRI和HindⅢ;末端互补序列—AATT— D、 BamHI和BglII;末端互补序列—GATC— 限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上 特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI, EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示 每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶 所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确 的末端互补序列为何?( ) 毕枕荷淋安攫酵枚葡藐淳族糖棒固蝗湾去基县谁冻息箔拜酉鄂厘冒仇涝吭高中生物修3第一章《基因工程》1.1 DNA重组技术的基本工具高中生物修3第一章《基因工程》1.1 DNA重组技术的基本工具 * * 取运邻兽适言洪仍亏朱郊济唱曾擎变戚蛊贸墩炼靠柬证悼语渠山陶嚼替缠高中生物修3第一章《基因工程》1.1 DNA重组技术的基本工具高中生物修3第一章《基因工程》1.1 DNA重组技术的基本工具 高二生物组 楷字诺膊吻精渣不凋匣业嫡傍锁绎毅
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