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蝎毒抗癌多肽对卵巢癌细胞株生长抑制及凋亡的影响 作者：徐波 王洁 曾建华 魏莲 【摘要】 目的：研究蝎毒抗癌多肽体外能否抑制卵巢癌细胞株 3AO 的生长及诱导其发生凋亡。 方法：采用噻唑蓝（MTT）法检测蝎毒抗癌多肽体外对卵巢癌细胞株 3AO 的生长与增殖的影响、流式细胞仪的方法进行凋亡峰的检测。 结果：蝎毒抗癌多肽体外作用于卵巢癌细胞株 3AO 后，能明显抑制其生长，并呈剂量效应关系。流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰，且峰值也呈剂量效应关系。 结论：蝎毒抗癌多肽体外能抑制卵巢癌细胞株 3AO 的生长，并能诱导其发生 凋亡。 【关键词】 蝎毒抗癌多肽；卵巢癌；凋亡 Polypeptide Extract From Scorpion Venom (PESV) Inhibits Proliferation and Induces Apoptosis on Ovarian Cancer Cell Lines 3AO in Vitro 〔Abstract〕 Objective To study whether PESV can inhibit proliferation and induce apoptosis on ovarian cancer cell lines 3AO in vitro. Methods Cell growth inhibition rate of ovarian cancer cell lines 3AO after treated with PESV was determined by MTT. Apoptotic peak was determined by flow cytometry. Results PESV could inhibit proliferation of ovarian cancer cell lines 3AO in vitro and it had some dose-effect relation. Apoptotic peak was detected by flow cytometry and it also had some dose-effect relation. Conclusion PESV can inhibit proliferation and induce apoptosis on ovarian cancer cell lines 3AO in vitro. 〔Key Words〕 PESV; Ovarian cancer; Apoptosis 迄今为止，卵巢癌仍是妇科肿瘤中难以早期发现，早期治疗的恶性肿瘤。手术和化疗是治疗卵巢癌的主要手段。此外，寻找新的药物抑制卵巢癌细胞的生长、增殖及转移有重要意义。近年来的研究表明，蝎毒多肽提取物（polypeptide extract from scorpion venom, PESV）具有抗癌作用[1]。本研究采用 MTT 法、流式细胞术、探讨 PESV 对卵巢癌细胞的生长及增殖的抑制作用和诱导凋亡的作用。 1 材料与方法 1.1 卵巢癌细胞株 3AO，重庆医科大学基础研究所提供，用 RPMI-1640 培养基培养，含 10% 小牛血清，2 mmol/L 谷氨酰胺，用 0.1% 胰酶消化传代。 1.2 PESV 由广州医学院提供，经冷冻干燥后的 PESV 于 - 20℃ 保存，使用时配成所需浓度。 1.3 细胞增殖分析 用 MTT 法分析 PESV 对 3AO 卵巢癌细胞株细胞增殖活性的影响。实验分调零孔（等体积培养液）、阴性对照组（培养液和单细胞悬液）、顺铂组（培养液、单细胞悬液和顺铂），PESV 组（培养液、单细胞悬液和 PESV），细胞接种于 96 孔板，细胞数为每孔 8×100 个/ 100 L，每个浓度设 3 个复孔，接种 24 h 后，分别加入不同浓度的顺铂和 PESV，继续培养 48 h 后加入 20 L 浓度为 5 mg/mL 的 MTT，继续培养 4 h，弃去培养基后每孔加入 200nbsp1 ; L DMSO，充分溶解后，用酶标仪于 570 nm 波长下读取每孔的吸光度A（OD 值）。细胞增殖抑制率（IR）按以下公式计算： 1.4 流式细胞仪检测 细胞经过不同药物处理 48 h 后， 将处理后的细胞用 0.1% 胰蛋白酶消化，PBS 吹打成单个细胞悬液。离心后用 70% 乙醇固定过夜。记数细胞，细胞数不少于 5×104/mL。加 PI 染色液，染色约 20 min，进行流式细胞仪检测， Cell Quest 和 Mod Fit L T 软件分析