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血管内皮生长因子在睾丸生殖细胞肿瘤中的表达 作者：罗小敏 杨嗣星 王玲珑 【摘要】 目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）表达及微血管计数与睾丸生殖细胞肿瘤（TGCT）临床病理特征的关系。方法 42例睾丸生殖细胞肿瘤和10例对照（无肿瘤浸润的去势睾丸组织）标本取自武汉大学人民医院病理科。应用免疫组化方法检测标本中血管内皮生长因子的表达及微血管计数（MVC），HE染色显示脉管（血管或淋巴管）浸润。结果 肿瘤组VEGF阳性表达率及MVC均显著高于对照组。VEGF表达在各病理类型组间无显著差别（Pgt;0.05）；随临床分期的进展VEGF表达增强（Plt;0.001）。III期肿瘤的MVC分别显著高于I、II期。VEGF表达与MVC之间呈较强正相关（r=0.675）。脉管浸润率随临床分期的增加而增加。但多因素分析显示仅VEGF表达与临床分期相关。结论 血管生成与TGCT的转移相关。VEGF在调节TGCT的血管生成及促进TGCT的临床进展方面可能发挥着重要作用，VEGF可作为反映TGCT生物学行为的客观指标。 【关键词】 睾丸肿瘤;血管内皮生长因子;血管新生 The Expression of Vascular Endothelial Growth Factor in Testicular Germ Cell Tumors Key words：Testicular germ cell tumors；Vascular endothelial growth factor；Microvessel counts 睾丸肿瘤是20～35岁男性最常见的实体瘤。新生血管的形成是实体瘤发生发展的重要因素，血管内皮生长因子（VEGF）是目前已知作用最强的促血管生成因子，其高表达在肿瘤的血管生成中起到了关键性作用。我们研究了睾丸生殖细胞肿瘤中VEGF的表达和微血管计数情况，现将结果报告如下。 1 资料与方法 1.1 研究对象 42例临床资料完整且经病理诊断证实的TGCT石蜡包埋标本以及10例去势（无肿瘤浸润）睾丸组织标本取自武汉大学人民医院病理科。肿瘤标本按病理类型分：精原细胞瘤19例、非精原细胞瘤23例（畸胎瘤9例、卵黄囊瘤8例、胚胎癌6例）；按临床分期分：I期20例、II期13例、III期9例。患者年龄5～63岁，平均32.7岁。 1.2 方法 每个蜡块取4μm厚连续切片作免疫组化染色及HE染色。免疫组化方法采用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物法（SP法），设阴、阳性对照，阳性对照片购自武汉亚法生物有限公司，PBS液代替一抗作阴性对照。免疫组化染色检测肿瘤组织VEGF表达和微血管情况。HE染色显示脉管浸润情况。 1.3 结果判定 1.3.1 VEGF阳性染色判定标准 细胞浆和/或细胞膜被染成棕黄色或棕褐色的肿瘤细胞或内皮细胞判断为VEGF染色阳性细胞，在光镜下随机选取三个高倍视野（×400），计算出其阳性细胞百分率。 1.3.2 微血管计数方法 被染成棕黄色或棕褐色的单个的内皮细胞、内皮细胞团（或簇）计为一个微血管。先在低倍（×40）光镜下选取新生血管密集的区域，再在高倍光镜下随机选取三个视野对微血管进行计数，三个视野中的平均值即为MVC。 1.3.3 脉管浸润标准 HE染色切片中肿瘤间质的血管或淋巴管内可见肿瘤细胞浸润为脉管浸润阳性。 1.4 统计学方法 各组VEGF阳性细胞百分率以及MVC以±s表示，组间差别分别采用单因素方差分析和q检验、χ2检验；对VEGF与MVC的相关性行直线相关与回归分析；各因素与临床分期的关系进行logistic多元回归分析；以Plt;0.05为差异显著性标准。 2 结果 2.1 VEGF在睾丸生殖细胞肿瘤中的表达 VEGF阳性染色主要定位于肿瘤细胞或内皮细胞的胞浆和/或细胞膜上，呈棕黄色或棕褐色。10例对照组织中2例阳性着色，占20%，这两例的阳性细胞百分率分别为4%、9%；42例TGCT中40例阳性着色，占95.2%，两者相比差异显著（Plt;0.001）。VEGF表达在TGCT四个病理类型组间无显著差异；随临床分期的增加，VEGF表达增强，各期之间两两比较差异均有显著性（Plt;0.001），见表1。表1 VEGF表达与TGCT临床病理特点的关系检测项病理类型临床分期SETEYAEMI期II期III期VEGF阳性细 注：SE：精原细胞瘤；TE：畸胎瘤；YA：卵黄囊瘤；EM：胚胎癌（下同），与I期比:△Plt;0.001；与I、II期比：*Plt;0.0012.2 睾丸生殖细胞肿瘤中微血管染色情况 微血管的内皮细胞被染成棕黄色或棕褐色。肿瘤间质中微血管较密集，多数形态不规则。