(DNA甲基化与卵巢癌研究进展.docVIP

【关键词】 卵巢癌;DNA甲基化;肿瘤抑制基因 卵巢癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一,由于缺少有效的早期诊断方法，其死亡率一直居妇科肿瘤之首。随着对卵巢癌发病机制的深入研究,人们认识到肿瘤的发生不仅与基因突变等遗传学机制有关,也与表观遗传学异常密切相关,其中DNA甲基化是表观遗传学机制最常见的形式。本文将对DNA异常甲基化在卵巢癌中的研究进展作一综述。 　　1 DNA甲基化与肿瘤 　　DNA甲基化是最早发现的基因表观修饰方式，是指在DNA甲基转移酶的催化下,以S腺苷甲硫氨酸作为甲基供体将胞嘧啶转变为5甲基胞嘧啶的一种生化过程。这种DNA修饰方式并没有改变基因序列，但是它调控了基因的表达。DNA甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。哺乳动物中，CpG序列在基因组中出现的频率仅有1%，但在基因组的某些区域中，CpG序列密度很高，可以达均值的5倍以上，成为鸟嘌呤和胞嘧啶的富集区，如基因的启动子区，这些区域被称之为CpG岛。健康人基因组中，CpG岛中的CpG位点通常是处于非甲基化状态，而在CpG岛外的CpG位点则通常以甲基化的形式存在。当肿瘤发生时，抑癌基因CpG岛中的CpG呈高度甲基化状态，以致于染色体螺旋程度增加及抑癌基因表达丢失[1]。 　　甲基化状态的改变是引起肿瘤的一个重要因素,其机制主要是肿瘤组织中存在基因组普遍低甲基化和局部区域过甲基化现象[2],由此引起原癌基因及促进细胞生长基因激活,抑癌基因及错配修复基因失活,以及染色体不稳定等共同导致肿瘤的发生发展。现已证明DNA甲基化是除杂合性缺失和基因突变之外,导致肿瘤抑制基因失活的第3种机制，而且在某些情况下是其失活的惟一机制[3]。目前已发现许多抑癌基因启动子区CpG岛在人类肿瘤及癌细胞株中发生异常甲基化,DNA甲基化异常在多种肿瘤的发生中起重要作用。 　　2 卵巢癌相关抑癌基因异常甲基化 　　2.1 RASSF1A 　　RASSF1A是RAS相关领域家族基因1(Ras associated domain family genes,RASSF)的A转录产物，编码一组RAS效应蛋白。RASSF1A在正常组织中100%表达,已有研究证实,无论在肺癌、乳腺癌还是前列腺癌中,均有RASSFIA基因的超甲基化,表现为该基因表达失活。Caceres等[4]检测卵巢癌组织中RASSF1A甲基化发生率为50%,认为RASSFIA启动子区甲基化可作为一种分子生物学指标,监测肿瘤的发生和发展。马琳等[5-6]用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测在卵巢癌组织和血液中RASSF1A甲基化的发生率分别为52.5%和43.1%,且多发生在临床晚期和组织分化差的患者;李其荣等[7]检测卵巢癌组织和血清中RASSF1A基因甲基化的发生率分别为40.3%和28.4%,癌组织中RASSF1A基因的甲基化状况与血清中出现RASSF1A基因甲基化关系密切(P0.01),表明血清RASSF1A基因异常甲基化检测可能用于卵巢癌早期筛查和预后判定。 　　2.2 DAPK 　　死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase,DAPK)广泛参与多种途径介导的细胞凋亡,被认为是肿瘤的抑制剂。DAPK基因启动子区CpG岛的甲基化，会导致DAPK表达的沉默，使一些凋亡信号不能通过DAPK诱导细胞凋亡，而使细胞有发展成肿瘤的可能性，这被认为是肿瘤发生的早期事件[8]。Collins等[9]用MSP方法检测卵巢癌中DAPK甲基化水平,发现2种卵巢癌细胞系(OVCAR3和A2780)DAPK发生甲基化，卵巢癌患者的组织和外周血中该基因甲基化分别为20/30(67%)和26/30(87%),显著高于正常组(无甲基化),提示通过检测血液中DAPK甲基化,有助于部分卵巢癌的早期诊断。Bai等[10]研究卵巢癌细胞系DAPK的表达时发现,5种卵巢癌细胞系中,有2种(MCAS和OVK18)DAPK基因表达明显减少,并且这2种细胞系DAPK基因启动子区均发生了甲基化，提示DAPK甲基化引起的基因沉默可能与卵巢癌的发生有关。 　　2.3 CDH1 　　CDH1基因编码E钙黏蛋白(Ecadherin)。Ecadherin可介导相邻的上皮细胞间依赖钙的细胞连接，它的低水平有助于肿瘤细胞浸润生长和由原发灶脱落转移。于月成[11]等应用MSP检测卵巢癌组织中CDH1甲基化,并用免疫组化法检测Ecadherin表达的情况,结果CDH1启动子甲基化全部出现在卵巢癌组且该组Ecadherin表达明显降低(P0.05),有淋巴结转移组中甲基化频率高于无淋巴结转移组(P0.05);提示CDH